詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:小鼠肌腱成纖維細(xì)胞
組織來源:肌腱
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
小鼠肌腱成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡介:
小鼠肌腱成纖維分離自肌腱組織;肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結(jié)締組織,,便于肌肉附著和固定,。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上,是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動不同骨的運動,。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分,,肌腹由肌纖維構(gòu)成,色紅質(zhì)軟,,有收縮能力,,肌腱由致密結(jié)締組織構(gòu)成,色乳白較硬,,沒有收縮能力,。肌腱把骨骼肌附著于骨骼。長肌的肌腱多呈圓索狀,,闊肌的肌腱闊而薄,,呈膜狀,又叫腱膜,。此處的肌腹即為通常所說的紅肌,,而肌腱即為白肌,分別控制肌肉的力量,、爆發(fā)力和耐力,。成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來,;成纖維細(xì)胞較大,,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的肺成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細(xì)胞基本貼壁,,伸展成梭形,胞核清晰,,分布較均勻,,散在生長,不聚集成團,;細(xì)胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,,平坦,、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,,細(xì)胞核較大,,呈橢圓形,顏色淡,。細(xì)胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠肌腱成纖維采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的小鼠肌腱成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
a)、對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理,?
1、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸浮),、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代,;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達80%左右再進行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時,,若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
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血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體
Pacific Blue標(biāo)記人CD57單克隆抗體
LGMN重組小鼠 Legumain/ LGMN 蛋白 Protein
CK18(Cytokeratin 18 0.5mgCK18(Cytokeratin 18) 細(xì)胞角蛋白18(多肽)
PARP3重組人 PARP-3 / PARP3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CFL2 Protein Human 重組人 CFL2 / cofilin 2 / ADF 蛋白
VSIG4 Protein Mouse 重組小鼠 VSIG4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
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VSIG4 Protein Mouse 重組小鼠 VSIG4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
PARP3重組人 PARP-3 / PARP3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
小鼠鐵調(diào)素(Hepcidin)pcr檢測試劑盒
Rat melanocyte aibody (MC Ab) ELISA Kit 大鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)試劑盒
HumanglycolipidaoaibodyELISAKit 人抗糖脂抗體(glycolipid)pcr檢測試劑盒分裝
Chickeoxoplasmacirculatingaigen,TCA試劑盒雞弓形蟲循環(huán)抗原(TCA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞RHO蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
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小鼠肌腱成纖維細(xì)胞大鼠糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體(GI)試劑盒 ,,英文名: GI ELISA Kit
Niu Shousu (LEP) ELISA Kit 牛瘦素(LEP)試劑盒
RatDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISAKit 大鼠脫輕表雄酮硫酸酯(DHEA-S)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforHMGB-1ELISAKit大鼠高遷移率族蛋白B1
細(xì)胞PKCι激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitE-Cad大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白