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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
小腸組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7585 |
細(xì)胞簡介：
小鼠小腸Cajal間質(zhì)分離自小腸組織,；小腸位于腹中,，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連,，是食物消化吸收的主要場所,。小腸盤曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門,，下接盲腸,，分為十二指腸、空腸和回腸三部分,。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,，因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動的機(jī)械性消化后,，基本上完成了消化過程,，同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜,、粘膜下層,、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,，粘膜有許多絨毛,，絨毛根部的上皮下陷至固有層,，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間,。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切,；構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞,、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞,。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似,，絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短,，不形成紋狀緣。Cajal間質(zhì)細(xì)胞（ICC）是一類主要分布于胃腸道的間質(zhì)細(xì)胞,，是胃腸道的起搏細(xì)胞和信號傳導(dǎo)細(xì)胞,，與肌細(xì)胞以及末梢神經(jīng)元有著緊密的關(guān)系，具有激發(fā)和促進(jìn)胃腸蠕動的作用,。借助于電子顯微鏡技術(shù),，清楚觀察到了ICC位置分布和內(nèi)部精細(xì)結(jié)構(gòu)；應(yīng)用免疫熒光等生化技術(shù),，發(fā)現(xiàn)了其特殊表達(dá)的c-kit蛋白,；利用電生理技術(shù)，得知多種胃腸動力障礙疾病也與其異常有關(guān),。多年來,，學(xué)者逐漸在胃腸道、膽道,、膀胱,、子宮等部位發(fā)現(xiàn)了ICC的蹤跡，并試圖闡述其與某些疾病的發(fā)生機(jī)制,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗；
4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長,；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠小腸Cajal間質(zhì)采用膠原酶消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠小腸Cajal間質(zhì)經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 英文名稱： Angiotensin Conveing Enzyme 規(guī)格： 英文縮寫： ACE
小鼠雄激素結(jié)合蛋白 英文名稱： Androgen Binding Protein 規(guī)格： 英文縮寫： ABP
小鼠促上腺皮質(zhì)激素 英文名稱： Adrenocor Ticoopic Hormore 規(guī)格： 英文縮寫： ACTH
小鼠半胱天冬蛋白酶-3 英文名稱： cysteine-aspaic acid protease-3 規(guī)格： 英文縮寫： Active Caspase-3
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human lymphotoxin beta (LTB) ELISA Kit 人淋巴毒素β(LTB)試劑盒
Humancholineacetylase,CHAcELISAKit 人乙?；?span>(CHAc)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickengrowthhormone,GH試劑盒雞生長激素(GH)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞CASPASE-8蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousehemeoxygenase1,HO-1ELISAKit小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
6號染色體開放閱讀框93抗體
α-甘露糖苷酶2x抗體
REG3D重組小鼠 REG3D 蛋白 Protein
Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原 0.5mgAggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原
C7重組人 C7 / Complement component 7 蛋白 Protein
CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白
IFNA4 Protein Rat 重組大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
玻連蛋白(VTN)重組蛋白 Recombinant Vitronectin (VTN)
CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白
CNDP1重組小鼠 CNDP1 蛋白 Protein
RBP4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 RBP4 蛋白
PPCDC重組人 PPC-DC / PPCDC 蛋白 Protein
小鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞大鼠蛋白聚糖4(PRG4)試劑盒 ，英文名： PRG4 ELISA Kit
Pig angiopoietin 1 (ANG-1) ELISA Kit 豬血管生成素1(ANG-1)試劑盒
病毒H5N1亞型核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T
CLIAKitforLptn/LTN/XCL1ELISAKit大鼠淋巴細(xì)胞趨化因子
通用免疫化學(xué)封閉溶液100毫升
ELISAKitSIgA雞分泌型免疫球蛋白A
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