詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
小腸組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7150 |
細胞簡介:
小鼠小腸隱窩上皮分離自小腸組織,;小腸位于腹中,,上端接幽門與胃相通,,下端通過闌門與大腸相連,,是食物消化吸收的主要場所,。小腸盤曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門,,下接盲腸,分為十二指腸,、空腸和回腸三部分,。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液,、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運動的機械性消化后,,基本上完成了消化過程,同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了,。小腸管壁由粘膜,、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點是管壁有環(huán)形皺襞,,粘膜有許多絨毛,,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,,其開口位于絨毛根部之間,。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切;構(gòu)成腸腺的細胞有柱狀細胞,、杯狀細胞,、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內(nèi)分泌細胞與絨毛上皮相似,,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣,。小腸有三種功能即消化,、吸收和分泌及運動功能,其中以吸收和分泌功能為主,。小腸腔面的環(huán)行皺襞從幽門附近開始出現(xiàn),,在十二指腸末段和空腸頭段極發(fā)達,向下逐漸減少和變矮,,至腸中段以下基本消失,。粘膜表面還有許多細小的腸絨毛,是由上皮和固有層向腸腔突起而成,,形狀不一,,以十二指腸和空腸頭段。絨毛于十二指腸呈葉狀,,于空腸呈指狀,,于回腸則細而短。環(huán)行皺襞和絨毛使小腸表面積擴大20-30倍,,絨毛根部的上皮下隱至固有層形成管狀的小腸腺,,又稱腸隱窩,故小腸腺與絨毛的上皮是連續(xù)的,,小腸腺直接開口于腸腔,。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗;
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長,;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠小腸隱窩上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠小腸隱窩上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒、小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠血管緊張素原試劑盒 小鼠血管緊張素原試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠血管緊張素原試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠血管緊張素原試劑盒,、小鼠血管緊張素原試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠血管緊張素試劑盒 小鼠血管緊張素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠血管緊張素試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠血管緊張素試劑盒,、小鼠血管緊張素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠血管活性腸肽試劑盒 小鼠血管活性腸肽試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠血管活性腸肽試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠血管活性腸肽試劑盒、小鼠血管活性腸肽試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat glamic acid decarboxylase aoaibody (GAD-Ab) ELISA Kit 大鼠谷脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)試劑盒
Humanβ-lipoopichormone,β-LPHELISAKit 人β-促脂素(β-LPH)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenGlucagon,GC試劑盒雞胰高血糖素(GC)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞CASPASE-7蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousehemeoxygenase2,HO-2ELISAKit小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
AF647標記的轉(zhuǎn)錄因子Pax6抗體
氨基丁酸轉(zhuǎn)運蛋白VGAT抗體
BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
CCR-1(CC chemokine receptor 1 0.5mgCCR-1(CC chemokine receptor 1) 細胞表面趨化因子受體1抗原
PTPMT1重組人 PTPMT1 蛋白 Protein
CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白
CD63 Protein Rat 重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白
CCR-1(CC chemokine receptor 1 0.5mgCCR-1(CC chemokine receptor 1) 細胞表面趨化因子受體1抗原
CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白
BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
CD63 Protein Rat 重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白
PTPMT1重組人 PTPMT1 蛋白 Protein
小鼠小腸隱窩上皮細胞大鼠蛋白激酶G(PKG)試劑盒 ,,英文名: PKG ELISA Kit
Pig angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 豬血管生成素2(ANG-2)試劑盒
病毒H5亞型核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T
CLIAKitforLPS(HumanLipopolysaccharides)ELISAKit人脂多糖/內(nèi)毒素
通用免疫化學(xué)固著溶液10毫升
ELISAKitPPP雞蛋卵黃高0蛋酸肽