詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
心臟組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X7410 |
細胞簡介:
小鼠心臟微血管內皮分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中最重要的一個器官,主要功能是為血液流動提供壓力,,把血液運行至身體各個部分,。心臟由心肌構成,,左心房,、左心室,、右心房,、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,,故互不相通,,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,,而不能倒流,。心臟的作用是推動血液流動,向器官,、組織提供充足的血流量,,以供應氧和各種營養(yǎng)物質,并帶走代謝的終產物(如二氧化碳,、無機鹽,、尿素和尿酸等),使細胞維持正常的代謝和功能,。心臟微血管內皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,,它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節(jié)血壓,、抗血栓形成等有重要作用,在心臟血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義,。近年來大量研究表明,,心肌微血管內皮細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能,也是諸多毒素,、炎癥因子及病毒等重要靶位,,其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠心臟微血管內皮采用膠原酶-混合消化法結合密度梯度離心法,、最后通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠心臟微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數,。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。
公司正在出售的產品:
小鼠血管內皮生長因子受體 -1(mouse VEGF-R1) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D
小鼠血管內皮生長因子受體 2(mouse VEGF-R2) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D
大鼠Active Caspase-3 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
大鼠Active Caspase-7 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human lymphotoxin alpha (LTA) ELISA Kit 人淋巴毒素α(LTA)試劑盒
Human6-hydroxydopamine,6-OHDAELISAKit 人6-羥多巴胺(6-OHDA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chickenglialfibrillaryacidicprotein,GFAP試劑盒雞神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞CASPASE-6蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousehepaticlipase,HLELISAKit小鼠肝脂酶(HL)試劑盒規(guī)格:96T/48T
APC標記人CD105單克隆抗體
表皮生長因子受體單克隆抗體
BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 Protein
CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環(huán)肽
STAT6重組人 STAT6 蛋白 Protein
CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白 (Fc 標簽)
CDH13 Protein Rat 重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白
CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環(huán)肽
CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白 (Fc 標簽)
BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 Protein
CDH13 Protein Rat 重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白
STAT6重組人 STAT6 蛋白 Protein
小鼠心臟微血管內皮細胞大鼠蛋白激酶C(PKC)試劑盒 ,,英文名: PKC ELISA Kit
Pig angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 豬血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)試劑盒
病毒H7亞型核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T
CLIAKitforLp-PL-A2(Mouselipoprotein-associatedphospholipaseA2)ELISAKit小鼠脂蛋白相關0脂酶A2
通用石蠟切片HRP酶聯(lián)檢測封閉溶液10毫升
ELISAKitHSVⅡ-Ab雞單皰疹病毒Ⅱ型抗體
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行