小鼠胰腺星狀細胞

商品屬性：

細胞簡介：

小鼠胰腺星狀分離自胰腺組織,；胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,，腺泡分泌胰液,，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有,、原,、脂肪酶、等,。胰液通過胰腺管排入十二指腸,，有消化蛋白質,、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,，胰島主要由4種細胞組成：α細胞,、β細胞、γ細胞及PP細胞,。α細胞分泌胰高血糖素,，升高血糖；β細胞分泌胰島素,，降低血糖,；γ細胞分泌，以旁分泌的方式抑制α,、β細胞的分泌,；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動,、胰液分泌和膽囊收縮,。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星狀細胞（PSC）是胰腺纖維化的主要效應細胞,，PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提,。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴,，并表達Desmin蛋白,，活化后的PSC則表達α-平滑肌肌動蛋白（alpha-SMA）。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種,，并分別具有特異的標志物,。靜息狀態(tài)PSC胞質內富含的維生素A脂滴可以被油紅O染成紅色，陽性表達Desmin,。激活狀態(tài)PSC陽性表達alpha-SMA,。油紅O染色發(fā)現(xiàn)，原代分離的細胞培養(yǎng)6d,，胞漿中仍可見明顯的脂滴,，傳代后，橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失,。免疫細胞化學染色顯示,，細胞接種24h仍然表達Desmin，48h后Desmin基本不再表達,。培養(yǎng)48h后絕大多數細胞開始表達alpha-SMA,，隨著培養(yǎng)時間的增長和傳代次數的增加，細胞表達alpha-SMA,，而不再表達Desmin,，說明細胞活化,。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程，至培養(yǎng)第6d大多數細胞激活,，傳代后細胞處于高度激活狀態(tài),。原代胰腺星狀細胞可作為慢性胰腺炎新藥的細胞篩選模型，目前研究發(fā)現(xiàn)：胰腺受損時,，在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細胞活化,，導致細胞形態(tài)、功能發(fā)生變化,，促使基質增生,、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積。

原代細胞的培養(yǎng)條件：

　　一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1,、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性,；

　　2,、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L,；

　　3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；

　　4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

　　6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；

　　7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,，應將原代細胞換液,；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,，應將細胞懸液經低速離心后換液,。

　　二、懸浮細胞培養(yǎng)

　　1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,；

　　2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；

　　3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗,；

　　4,、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長；

　　5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；

　　6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行,。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠胰腺星狀采用膠原酶制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠胰腺星狀經α-SMA,、Desmin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

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小鼠胰腺星狀細胞大鼠促腎上皮質激素釋放激素(CRH)試劑盒 ,，英文名： CRH ELISA Kit

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