詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
陰道組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7736 |
細胞簡介:
小鼠陰道壁成纖維分離自陰道組織,;陰道位于膀胱、尿道和直腸之間,,是一個富有彈性的管狀器官,。它在人類生殖過程中具有多種生理功能,是連接子宮與外陰的通道,,是排出月經(jīng)血,、娩出嬰兒的必經(jīng)之路,也是一個重要的性交器官,。陰道壁按組織學由外到內(nèi)分三層,,即黏膜層,、肌層和外膜。1)黏膜層由上皮和固有膜組成,。上皮較厚,,為復層鱗狀上皮,從基底層到表層由基底層,、旁基底層,、中間層和表層組成。沒有角化層,。陰道粘膜的基底層呈細波紋狀起伏,。2)肌層由平滑肌組織構成,肌束排列不規(guī)則,,縱行和環(huán)形互相交錯,。肌束間有較多的結締組織和彈性纖維。陰道外口有環(huán)形的橫紋肌稱括約肌,。3)外膜層為纖維膜,,由結締組織構成,內(nèi)含豐富的彈性纖維,、靜脈叢,、淋巴管和神經(jīng)。大鼠陰道壁成纖維細胞主要分離自外膜層,,成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠陰道壁成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠陰道壁成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代左右,;2代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
甜菜堿含量測定試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
二0酸核糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
二0酸核糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)試劑盒 紫外分光光度法 25管/24樣
漆酶試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣
小鼠11β羥基類固醇脫氫酶(11β-HSD)試劑盒 96T/48T
Human gasin cell aibody (GCA) ELISA Kit 人胃泌素細胞抗體(GCA)試劑盒
PorcinePrednisoloneELISAKit 豬龍(Prednisolone)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCpGoligodeoxynucleotide,CpG-ODN試劑盒人未甲基化寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織COT激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanProteinCarbonyl,,PCELISAKit人羰基化蛋白(PC)試劑盒規(guī)格:96T/48T
FITC標記人CD127 (IL7R)單克隆抗體
芳香烴受體重組兔單克隆抗體
CA12重組人 Carbonic Anhydrase XII / CA12 蛋白 Protein
顆粒酶K(GZMK)重組蛋白 Recombinant Granzyme K (GZMK)
MRPL44重組人 MRPL44 蛋白 Protein
IFNAR2 Protein Human 重組人 IFNAR2 / IFNABR 蛋白
HA Protein H2N2 重組甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
顆粒酶K(GZMK)重組蛋白 Recombinant Granzyme K (GZMK)
IFNAR2 Protein Human 重組人 IFNAR2 / IFNABR 蛋白
CA12重組人 Carbonic Anhydrase XII / CA12 蛋白 Protein
HA Protein H2N2 重組甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
MRPL44重組人 MRPL44 蛋白 Protein
小鼠陰道壁成纖維細胞大鼠促卵泡素(FSH)試劑盒 ,英文名: FSH ELISA Kit
Mouse 17 hydroxyprogesterone (17-OHP) ELISA Kit 小鼠17羥孕酮(17-OHP)試劑盒
ELISA 小鼠N端前腦素(mouse -proBNP) 進口分裝
CLIAKitforLHRH(MouseLeinizingHormone-ReleasingHormone)ELISAKit小鼠黃體生成素釋放激素
通用型HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定性試劑盒20次
ELISAKitSJA槐凝集素
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂??;
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行