詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:小鼠真皮毛乳頭細(xì)胞
組織來(lái)源:皮膚組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次;
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠真皮毛乳頭分離自皮膚毛囊組織,;毛囊是表皮細(xì)胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進(jìn)的真皮毛乳頭,,中心是一根毛發(fā),,立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上,附著點(diǎn)的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,,毛囊在皮膚表面的開(kāi)口是毛囊孔,。毛囊位于真皮和皮下組織中,毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,,它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘,,以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個(gè)結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織。毛囊實(shí)際上是由結(jié)締組織和上皮兩部分所組成,,除了具有結(jié)締組織和血管的真皮乳頭(毛乳頭)外,,毛囊其余部分都是由表皮細(xì)胞分化而來(lái)。真皮毛乳頭細(xì)胞位于毛囊基底部,,是一類成纖維細(xì)胞,。在毛囊發(fā)育早期,真皮細(xì)胞向單層上皮細(xì)胞發(fā)出真皮信號(hào),,刺激上皮局部形成毛基板,。隨后毛基板細(xì)胞向下方的真皮發(fā)出表皮信號(hào),誘導(dǎo)其形成有成纖維細(xì)胞組成的凝集細(xì)胞團(tuán),。在此過(guò)程中,,毛母質(zhì)細(xì)胞逐漸包裹凝集細(xì)胞團(tuán),形成成熟的真皮毛乳頭細(xì)胞,。作為毛囊中的重要細(xì)胞群,,真皮毛乳頭細(xì)胞的分子機(jī)制和臨床應(yīng)用正在被逐漸認(rèn)識(shí)和解析。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠真皮毛乳頭采用膠原酶-混合消化法制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠真皮毛乳頭經(jīng)層粘連蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a),、對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理,?
1、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請(qǐng)拍照,,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,,可正常傳代,;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒 兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒,、兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
兔子纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒 兔子纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔子纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒,、兔子纖溶酶原激活物抑制因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子雙氫睪試劑盒 兔子雙氫睪試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子雙氫睪試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子雙氫睪試劑盒,、兔子雙氫睪eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
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