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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
血管組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7278 |
細胞簡介：
小鼠血管外膜成纖維分離自血管外膜組織；血管外膜是由疏松結締組織組成,，其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結締組織細胞以成纖維細胞為主,，當血管受損傷時,，成纖維細胞具有修復外膜的能力。有的動脈中膜和外膜的交界處,，有密集的彈性纖維組成的外彈性膜,。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來,。成纖維細胞較大,，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,，細胞質嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下,，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化,；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用,。剛分離的血管外膜成纖維細胞呈圓形,、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起,；6h后細胞基本貼壁,，伸展成梭形，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長，不聚集成團,；細胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密,，有的交叉重疊生長,，平坦、胞體較大,，細胞質透明,，細胞核較大,，呈橢圓形，顏色淡,。細胞融合,，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。血管外膜成纖維細胞是血管外膜的主要組成細胞之一,，其主要生理功能合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性,；
2,、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L,；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,，應將原代細胞換液,；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,，應將細胞懸液經低速離心后換液,。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,；
2、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,，進行分瓶試驗,；
4,、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長,；
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠血管外膜成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測：
公司實驗室分離的小鼠血管外膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數板計數,。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。
公司正在出售的產品：
小鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠雌三醇(E3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠雄烯二(ASD)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠游離睪(F-TESTO)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠原激活肽(TAP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human soluble endothelial protein C receptor (sEPCR) ELISA Kit 人可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)試劑盒
HumanSolubleAdenylateCyclase,sACELISAKit 人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor17-OHCS(Human17-Hydroxycoicosteroids)ELISAKit人17羥皮質類固醇
飲料精(arginine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
MouseLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit小鼠白三烯B4(LTB4)試劑盒規(guī)格：96T/48T
CD73重組兔單克隆抗體
單體櫻桃紅熒光蛋白標簽抗體
IL13RA2重組人 IL13RA2 / IL13R 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
瘦素受體(LEPR)重組蛋白 Recombinant Leptin Receptor (LEPR)
LIF重組人 LIF 蛋白 Protein
CD1D Protein Human 重組人 CD1D / R3G1 蛋白
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
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CD1D Protein Human 重組人 CD1D / R3G1 蛋白
IL13RA2重組人 IL13RA2 / IL13R 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
LIF重組人 LIF 蛋白 Protein
小鼠血管外膜成纖維細胞大鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒 ,，英文名： MCP-4/CCL13 ELISA Kit
Porcine insulin-like growth factor 2 (IGF-2) ELISA Kit 豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)試劑盒
ELISA 小鼠抗核抗體(mouse ANA) 進口分裝
CLIAKitforLp-AlphaELISAKit大鼠脂蛋白α
通用型CHIPDNA分子庫構建試劑盒10次
ELISAKitIL-3雞白介素3
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