詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
胎盤組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7696 |
細胞簡介:
小鼠羊膜間質(zhì)分離自胎盤組織,;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成,。胎兒在子宮中發(fā)育,,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,,是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,,胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊,、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達到母子間物質(zhì)的交換,,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤,。羊膜是胎盤的最內(nèi)層,與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似,,含有眼表上皮細胞,,包括結(jié)膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質(zhì),其光滑,,無血管,、神經(jīng)及淋巴,具有一定的彈性,;在電鏡下,,其分為五層:上皮層,、基底膜、致密層,、纖維母細胞層和海綿層,,羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元,主要為Ⅰ,、Ⅲ,、Ⅳ、Ⅴ,、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白,、層粘連蛋白等成份。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質(zhì)細胞組成,,均具有多分化潛能,,可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元,且還有合成,、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能,。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠羊膜間質(zhì)采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠羊膜間質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor B 規(guī)格: 英文縮寫: VEGF-B
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor C 規(guī)格: 英文縮寫: VEGF-C
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子D 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor D 規(guī)格: 英文縮寫: VEGF-D
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor receptor 1 規(guī)格: 英文縮寫: VEGF-R1
小鼠纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat LDL-IC ELISA Kit (OFQ/N) 大鼠孤腓肽(OFQ/N)試劑盒
HumanFreeerythrocyteproloporphyrin,FEPELISAKit 人游離原卟啉(FEP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chickenfollicle-stimulatinghormone,FSH試劑盒雞促卵泡素(FSH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞CASPASE-5蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MousehepatitisBviruscoreaibody,HBcAbELISAKit小鼠乙型肝核心抗體(HBcAb)試劑盒規(guī)格:96T/48T
DYX1C1蛋白抗體
電壓門控鈉通道5α抗體
CHL1重組小鼠 CHL-1 蛋白 Protein
滑行蛋白α(TXLNα)重組蛋白 Recombinant Taxilin Alpha (TXLNa)
STX3重組人 STX3 / Syntaxin 3 蛋白 Protein
CD9 Protein Human 重組人 CD9 / Tspan-29 蛋白
IL1R2 Protein Canine 重組狗 IL1R2 / IL1RB 蛋白 (Fc 標簽)
滑行蛋白α(TXLNα)重組蛋白 Recombinant Taxilin Alpha (TXLNa)
CD9 Protein Human 重組人 CD9 / Tspan-29 蛋白
CHL1重組小鼠 CHL-1 蛋白 Protein
IL1R2 Protein Canine 重組狗 IL1R2 / IL1RB 蛋白 (Fc 標簽)
STX3重組人 STX3 / Syntaxin 3 蛋白 Protein
小鼠羊膜間質(zhì)細胞大鼠單胺氧化酶(MAO)試劑盒 ,英文名: MAO ELISA Kit
Pig fat protein alpha (Lp- alpha) ELISA Kit 豬脂蛋白α(Lp-α)試劑盒
ELISA 小鼠固酮(mouse ALD) 進口分裝
CLIAKitforLN(MouseLaminin)ELISAKit小鼠層連蛋白/板層素
通用型DNA克隆試劑盒(包括內(nèi)切酶)10次
ELISAKitIFN-γ雞γ干擾素