詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:小鼠羊膜上皮細(xì)胞
組織來源:胎盤組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠羊膜上皮分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長(zhǎng)成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,,由羊膜,、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,,依靠胎盤從母體取得營(yíng)養(yǎng),,而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,,是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官,。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長(zhǎng)出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊,、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的最內(nèi)層,,與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似,,含有眼表上皮細(xì)胞,包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的物質(zhì),,其光滑,,無血管、神經(jīng)及淋巴,,具有一定的彈性,;在電鏡下,其分為五層:上皮層,、基底膜,、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層,,羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元,,主要為Ⅰ、Ⅲ,、Ⅳ,、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白,、層粘連蛋白等成份,。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成,均具有多分化潛能,,可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元,,且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的功能,。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠羊膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠羊膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a),、對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
血小板生成素 英文名稱: Thromboietin 規(guī)格: 英文縮寫: TPO
總蛋白S 英文名稱: total protein S 規(guī)格: 英文縮寫: TPS
壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體 英文名稱: tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 規(guī)格: 英文縮寫: AIL/APO 2L
壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體1 英文名稱: tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor 1 規(guī)格: 英文縮寫: AIL R1
小鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai ypsin (AT) ELISA Kit 人抗(AT)試劑盒
HumanglathioneS-ansferases,GSTpiELISAKit 人硫轉(zhuǎn)移酶pi基因(GSTpi)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforABCG2(HumanATP-bindingcassetteanspoerG2)ELISAKit人腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2
伊紅甲基藍(lán)(EMB)革蘭氏陰性細(xì)菌選擇瓊脂平板50個(gè)
Mouseniicoxidesyhase,NOSELISAKit小鼠合成酶(NOS)試劑盒規(guī)格:96T/48T
eIF4A3蛋白抗體
端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶抗體
PRLR重組大鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白 Protein
HCV-Core 丙型肝病毒-C區(qū)(多肽 1mgHCV-Core 丙型肝病毒-C區(qū)(多肽)
CDK16重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
CCL1 Protein Human 重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白
CD6 Protein Mouse 重組小鼠 CD6 / TP120 蛋白
HCV-Core 丙型肝病毒-C區(qū)(多肽 1mgHCV-Core 丙型肝病毒-C區(qū)(多肽)
CCL1 Protein Human 重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白
PRLR重組大鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白 Protein
CD6 Protein Mouse 重組小鼠 CD6 / TP120 蛋白
CDK16重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
小鼠羊膜上皮細(xì)胞大鼠催乳素(PRL)試劑盒 ,,英文名: PRL ELISA Kit
Porcine tumor necrosis factor alpha (TNF- alpha) ELISA Kit 豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒
ELISA 小鼠血管抑素(mouse Angiostatin) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLNELISAKit大鼠層連蛋白/板層素
通用型DNA平滑末端連接克隆試劑盒(包括內(nèi)切酶)10次
ELISAKitIFN-β/IFNB雞β干擾素
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請(qǐng)拍照,,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,,可正常傳代,;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作