詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
支氣管組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7488 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠支氣管平滑肌分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),,是指由支氣管分出的各級(jí)分枝,,由支氣管分出的一級(jí)支氣管,,即左,、右主支氣管,。左主支氣管與右主支氣管相比較,,前者較細(xì)長(zhǎng),,走向傾斜;后者較粗短,,走向較前者略直,,所以經(jīng)支氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和支氣管還有以區(qū)別就是,,支氣管是以“C"型的支氣管軟骨為支架,,而支氣管不是。支氣管平滑肌細(xì)胞主要功能:①支氣管平滑肌細(xì)胞能維持支氣管張力,,保持支氣管形態(tài),;②支氣管平滑肌特異的超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和調(diào)節(jié)機(jī)制是支氣管正常生理功能的基礎(chǔ);③支氣管平滑肌通過分泌細(xì)胞因子和趨化因子等促炎介質(zhì),,發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能,。支氣管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,,核卵圓形,、居中;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,,胞漿豐富,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),,高低起伏,;細(xì)胞密度低時(shí),,常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn),。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠支氣管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠支氣管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠抗單核細(xì)胞抗體試劑盒 小鼠抗單核細(xì)胞抗體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠抗單核細(xì)胞抗體試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠抗單核細(xì)胞抗體試劑盒、小鼠抗單核細(xì)胞抗體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
小鼠釋放激素試劑盒 小鼠釋放激素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠釋放激素試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠釋放激素試劑盒,、小鼠釋放激素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠促上腺皮質(zhì)激素試劑盒 小鼠促上腺皮質(zhì)激素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠促上腺皮質(zhì)激素試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠促上腺皮質(zhì)激素試劑盒,、小鼠促上腺皮質(zhì)激素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒 小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒、小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
小鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat calcitonin gene related peptide (CGRP) ELISA Kit 大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)試劑盒
Humaneyemuscleaibody,EMAbELISAKit 人抗眼肌抗體(EMAb)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanacidsphingomyelinase,ASM試劑盒人酸性神經(jīng)鞘0脂酶(ASM)試劑盒規(guī)格:96T/48T
脂蛋白脂酶活性比色法定量試劑盒20次
Mouseai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISAKit小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
GATA2/GATA3抗體
富含亮重復(fù)蛋白8D抗體
CLEC4A3重組大鼠 CLEC4A3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
DRD5 receptor(dopamine D5 receptor 0.5mgDRD5 receptor(dopamine D5 receptor) 多巴胺受體-D5抗原
VAPB重組人 VAPB / VAMP-associated protein B/C 蛋白 Protein
CTSZ Protein Human 重組人 CTSZ 蛋白
THY1 Protein Mouse 重組小鼠 CD90 / THY-1 蛋白
DRD5 receptor(dopamine D5 receptor 0.5mgDRD5 receptor(dopamine D5 receptor) 多巴胺受體-D5抗原
CTSZ Protein Human 重組人 CTSZ 蛋白
CLEC4A3重組大鼠 CLEC4A3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
THY1 Protein Mouse 重組小鼠 CD90 / THY-1 蛋白
VAPB重組人 VAPB / VAMP-associated protein B/C 蛋白 Protein
小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞大鼠促黃體激素(LH)試劑盒 ,,英文名: LH ELISA Kit
Mouse procollagen I carboxy terminal peptide (P I CP) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒
ELISA 小鼠環(huán)氧化酶-2 (mouse COX-2) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLHPoulyELISAKitLH禽類酶聯(lián)免疫試劑盒
通用型HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
ELISAKitVEGFR-3血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長(zhǎng),;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行