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人皰疹病毒 8 型 PCR 試劑盒說明書
閱讀：355 發(fā)布時(shí)間：2024-6-4| 提 供 商 | 上海研生實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 12.6KB |
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人皰疹病毒 8 型 PCR 試劑盒說明書
【產(chǎn)品名稱】
商品名稱：人皰疹病毒 8 型 PCR 試劑盒
Name ：Human Herpesvirus-8 (HHV-8) PCR Kit
【包裝規(guī)格】50 次/盒
【產(chǎn)品及特點(diǎn)】
人皰疹病毒 8 型(Human Herpesvirus-8,HHV-8)是從淋巴增生性疾
病和艾滋病患者淋巴細(xì)胞中培養(yǎng)獲得的一種新病毒,，可通過唾液飛沫及密
切接觸（如接吻，共用餐,、飲器具等）,、輸血傳播。除免疫低
下（如先天性免疫缺陷,、艾滋病,、長期服用免疫抑制劑等）外，絕大多數(shù)
人感染后終身都不會產(chǎn)生明顯癥狀,；免疫低下者,，如 HIV 感染者，當(dāng)人
體特異性免疫被削弱至一定程度時(shí),， 潛伏的病毒可被激活并產(chǎn)生急性感
染癥狀,，此時(shí)會出現(xiàn)間質(zhì)性肺炎、腦炎,、腦膜炎,、肝炎及多器官衰竭等癥
狀，活化的病毒可大規(guī)模感染 T 淋巴細(xì)胞,，使免疫功能進(jìn)一步削弱,，該
病毒對人體健康有較大影響，因此檢測人皰疹病毒 8型 DNA 具有重要意
義,。本產(chǎn)品就是根據(jù) PCR 原理開發(fā)的,、檢測此病毒的試劑盒。本產(chǎn)品具
有下列特點(diǎn)：
1.即開即用,，用戶只需要提供病毒 DNA 模板,。
2.引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng),，只擴(kuò)增人皰疹病毒8 型病毒 DNA,，與
其他病毒沒有交叉反應(yīng),。
3.提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品,。
4.PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳。
5.本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,，但只能用于科研,。
【規(guī)格及成分】
成 份 編號 十孔盒包裝
PCR MagicMix 3.0 63981 1 mL（紅蓋）
超純水 109350 1 mL（亮黃色）
人皰疹病毒 8型 PCR 引物混合液 3026yw 100 μL（白蓋）
人皰疹病毒 8 型 PCR 陽性對照
（1×10E8 拷貝/μL）
93981-3026pc 50 μL（黃蓋）
【運(yùn)輸及保存】
低溫運(yùn)輸，-20℃保存,，保存期限為一年,。人皰疹病毒 8 型 PCR 陽性對
照需要單獨(dú)放置，不要污染其他試劑,。
【自備試劑】
樣品 DNA,。
【使用方法】
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA,，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA
提取試劑盒兼容,。
2.如果有 N 個(gè)樣品，則需做 N+2 個(gè)提取,，包括一個(gè)樣品制備陽性對照和
一個(gè)樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是人皰疹病毒8 型 PCR 陽性
對照的 1000 倍稀釋液,，其總體積等于試劑盒所需的樣品量,，樣品制備陰
性對照是直接用水。
二,、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）
3.對 N+2 個(gè)樣品,，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對照和一個(gè) PCR 陰
性對照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng),。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成
分：
成分
N+2 個(gè)
樣品管
PCR 陰性
對照
PCR 陽性
對照
PCR Magic Mix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL
人皰疹病毒 8 型通用 PCR 引物混
合液
各 2 μL 2 μL 2 μL
N+2 個(gè)樣品 DNA 模板 各 18 μL - -
PCR 陰性對照（水） - 18 μL -
PCR 陽性對照（人皰疹病毒 6 型通
用 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋
液）
- - 18 μL
4.按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng): 過程 溫度 時(shí)間
預(yù)變性 95℃ 5 min
PCR 反應(yīng)
（35 個(gè)循環(huán)）
95℃ 15 sec
55℃ 15 sec
82℃ 30 sec 最后延伸 82℃ 10 min 三,、電泳檢測
5.取 5μL PCR 產(chǎn)物電泳進(jìn)行檢測。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束
后可以直接上樣,，不需要另外再加 loading buffer,。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長
度為 481bp。陽性對照必須有此條帶出現(xiàn),，陰性對照必須無任何擴(kuò)增,，否
則實(shí)驗(yàn)無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增
以排除 PCR 抑制劑的感染,。