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開(kāi)心果源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
閱讀：662 發(fā)布時(shí)間：2021-3-5| 提 供 商 | 上海研生實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 14KB |
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開(kāi)心果源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū)
概述：
熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過(guò)程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增,，PCR產(chǎn)物不斷積累,，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加,，這樣就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度的變化來(lái)對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè),。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針?lè)āＭㄟ^(guò)對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測(cè), 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量,、定量和定性分析,。
開(kāi)心果源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法：
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次,，在72℃ 保7min,。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油,；否則,，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
開(kāi)心果源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒注意事項(xiàng)：
1．基礎(chǔ)程序,；
2．?dāng)U增溫度和延伸溫度,；
3．反應(yīng)時(shí)間；
4．循環(huán)次數(shù),；
5．PCR 反應(yīng)液的配制,；
6．PCR技術(shù)的基本原理；
7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué),；
8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,；
9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品,。
熒光定量PCR服務(wù)：
簡(jiǎn)介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出,，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比,，它具有特異性更強(qiáng),、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn),，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化,；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片,，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等,。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成,，開(kāi)心果源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒主要定量PCR儀器,。
1、熒光定量PCR服務(wù)要求：
（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料,；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）,；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。
（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列,。
（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來(lái)源等
2,、熒光定量PCR操作程序
（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成,。
（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,。
（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn),，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。
（04）實(shí)驗(yàn)完成后,，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料,。
3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：
我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn),。