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白水河病毒PCR試劑盒準備試劑與收集血樣：

雙重核酸試劑盒（熒光PCR法）　1.  收集標本：血清,、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽,、肝素抗凝）,、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,， 2-8 ℃ 保存48 小時,；更長時間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復凍融,。

2.  標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,，管加標本稀釋液 900ul ,，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,，移至第二管 ,。如此反復作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去,。第八 管 為空白對照,。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。

4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘,。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,，向濾紙上印干,。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul ,。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘,。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul ,。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘,。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ,，置 37   ℃ 暗處反應15 分鐘,。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值,。