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瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白5抗體(M亞家族)的實(shí)驗(yàn)步驟
閱讀:519 發(fā)布時(shí)間:2024-6-6瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白5抗體(M亞家族)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水,、熒光標(biāo)記的抗體溶液,、緩沖甘油,、搪瓷桶三只,、有蓋搪瓷盒一只,、熒光顯微鏡、玻片架,、濾紙,、37℃溫箱等。
二,、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,,十分鐘后棄去,,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,,使其覆蓋標(biāo)本,,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考,。
3.取出玻片,,置玻片架上,先用0.01mol/L,,pH7.4的PBS沖洗后,,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,,每缸三到五分鐘,,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,,用濾紙吸去多余水分,,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,,以蓋玻片覆蓋,。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度,。