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人胚胎滋養(yǎng)層組織提取物?細(xì)胞處理

閱讀:679          發(fā)布時(shí)間:2023-3-16

人胚胎滋養(yǎng)層組織提取物細(xì)胞處理:


1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,吹打均勻后,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存,。凍存培養(yǎng)基

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑,。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基,。

1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果,。 

2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白,、無菌凍存培養(yǎng)基,,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存,。


胚胎滋養(yǎng)層是母親子宮內(nèi)膜和發(fā)育中胚胎之間的營(yíng)養(yǎng)通路,。緊貼在子宮壁的滋養(yǎng)層是胚胎著床*的步驟,隨后形成胎盤,。公司科技提供來自新鮮或冷凍人胚胎滋養(yǎng)層組織中高質(zhì)量的總RNA,,PCR準(zhǔn)備的條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分,。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院,,采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量,。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

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