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技術(shù)文章

小鼠白細(xì)胞活化黏附因子ELISA試劑盒樣本處理及要求

閱讀:756          發(fā)布時間:2022-3-14

小鼠白細(xì)胞活化黏附因子ELISA試劑盒樣本處理及要求:

1.  血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過一夜,,然后1000×g離心20 分鐘,,取上清即可,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

2.  血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

3.  組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),,稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,,于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,,或反復(fù)凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測,。

4.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

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