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大鼠CD30分子(CD30)ELISA試劑盒操作流程
閱讀:1493 發(fā)布時間:2020-12-301. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加,。
4. 除空白孔外,,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板),。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,,37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,,在450nm波長處測定各孔的OD值,。
結 果判斷與分析:
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2,、以吸光度OD值為縱坐標(Y),,相應的指標標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,,樣品的含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度, 再乘以稀釋倍數(shù),;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,,計算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度,。