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西尼羅病毒PCR檢測試劑盒反應(yīng)液的配制：

PCR反應(yīng)體系的配置方式有時也會影響反應(yīng)的正常進(jìn)行,。常規(guī)方法與其它酶學(xué)反應(yīng)一樣,，在后加入DNA聚合酶,。早期的PCR儀沒有帶加熱的蓋子，要求在反應(yīng)液上覆蓋一層礦物油,，防止水分蒸發(fā),。

對于使用具3’-5’外切活性的高溫DNA聚合酶時，有時會擴(kuò)增不出產(chǎn)物,。在遇到這個問題時,，如果將反應(yīng)成分分開配制,，A管含模板、引物和dNTP,，以及調(diào)整體積的H2O,，B管含緩沖液、DNA聚合酶和水,，然后再將兩管溶液混合起來,，可較好地克服這個問題。

 據(jù)我司規(guī)定未開封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存,。請注意,，收到試劑盒后請盡快將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A,、檢測溶液B以及96孔板保存于-20℃,。

按照常規(guī)的方法配制反應(yīng)體系，有時會出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增的問題,。熱啟動（hotstart）PCR操作方式可較好解決這一問題,。將dNTP、緩沖液,，Mg2+和primer先配制好,，然后加入一粒蠟珠（如AmpliWaxPCRQam100），加熱熔化,，再冷卻,，使蠟將溶液封住，后加入模板和DNA聚合酶等剩余成分,。只有當(dāng)PCR反應(yīng)進(jìn)入高溫階段后,，蠟層熔化，所有反應(yīng)成分才會混合在一起,。