蛋白質(zhì)印跡法（免疫印跡試驗(yàn)）即Western Blot,。它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法,。其基本原理是通過(guò)特異性抗體對(duì)凝膠電泳處理過(guò)的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色,。通過(guò)分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中表達(dá)情況的信息。
1,、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
（1）從－20℃將1mg/ml BSA取出,，室溫融化后備用。
（2）將1.5ml離心管取18個(gè),，3個(gè)一組,，分別標(biāo)記為0μg，2.5μg,，5.0μg,，10.0μg，20.0μg,，40.0μg,。
（3）根據(jù)下面的表格將各種試劑加入到各管中。
（4）混勻后,，室溫放置2分鐘,，在生物分光光度計(jì)（Bio－Photometer,，Eppentoff）上比色分析。
2,、樣品蛋白含量的檢測(cè)
（1）取1.5ml離心管足夠多,，將1ml4℃儲(chǔ)存的考馬斯亮藍(lán)溶液分別加入到每個(gè)離心管中，在室溫下放置30分鐘以后,，就能夠被用來(lái)對(duì)蛋白進(jìn)行檢測(cè),。
（2）將100ul 0.15mol/L NaCl溶液加入到取出的一管考馬斯亮藍(lán)溶液中，混勻放置2min中,，就能夠作為空白樣品,，在比色杯中倒入空白樣品，在做好標(biāo)準(zhǔn)曲線的程序下按blank對(duì)空白樣品進(jìn)行檢測(cè),。
（3）將空白樣品棄掉，比色杯使用無(wú)水乙醇清洗2次（每次0.5mL）,，再將其使用無(wú)菌水洗一次,。
（4）將95ul 0.15mol/L NaCl加入到取出的一管考馬斯亮藍(lán)溶液中，混勻后靜置2min,，往扣干的比色杯中倒入按sample鍵對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè),。
蛋白印跡儀被廣泛應(yīng)用于臨床診斷領(lǐng)域，如篩選和確診引起感染性疾病的不同致病源（如病毒或細(xì)菌）,，以及過(guò)敏原鑒定,。全自動(dòng)蛋白印跡儀能將蛋白印跡處理中的所有關(guān)鍵步驟自動(dòng)化，尤其是繁瑣的清洗和孵育步驟,。
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