基因測序技術(shù)是一種基因檢測技術(shù),，也被稱為DNA測序技術(shù),，是進行分子生物學(xué)研究和基因改造的基礎(chǔ),，也是解鎖人類生命奧秘的重要方式之一,。基因測序技術(shù)發(fā)展了40余年,，已在眾多領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用,，包括生物的基因組圖譜繪制、物種進化演替過程,、表觀遺傳學(xué),、疾病相關(guān)基因的確定和診斷等等。近年來,，基因測序相關(guān)產(chǎn)品和技術(shù)由實驗室研究演變到臨床使用,，為我們理解人類生物學(xué)特征和疾病，評估遺傳疾病提供了關(guān)鍵性信息,，所以說基因測序技術(shù)是下一個改變世界的技術(shù)毫不為過,。

    在疫情期間，這項技術(shù)得到了更多人的關(guān)注,。疫情爆發(fā)初期,，在不到一個月的時間內(nèi)，通過基因測序技術(shù),，病毒的基因組序列被公布,，為分析病毒的進化來源、致病機制提供了資料,。不少國家也發(fā)起了患者基因測序計劃,，以了解個人基因?qū)Σ《靖腥痉磻?yīng)的影響，這項研究的數(shù)據(jù)將為患者護理及藥物處方提供信息,，未來還可以幫助疫苗設(shè)計，從而拯救更多生命,。

    整個測序環(huán)節(jié)中,，從樣品收集到上機測序，水貫穿了包括測序儀的日常清洗維護和試劑配制在內(nèi)的每一個環(huán)節(jié),。作為一個*的基礎(chǔ)試劑,，水的品質(zhì)對終測序結(jié)果會產(chǎn)生顯著影響。水中的雜質(zhì),，如無機鹽,、有機物、核酸酶,、顆粒物等,，不僅會污染設(shè)備,，縮短測序儀毛細管的使用壽命，而且還會降低DNA聚合酶的活性,，終干擾測序結(jié)果的準(zhǔn)確性,。

下面這些基因測序經(jīng)常遇到的問題很有可能是使用的水有問題，快來看看你有沒有中招…

Q1：DNA測序樣品用什么溶劑溶解比較好,？

溶解DNA測序樣品,，使用超純水溶解為宜。

原因： DNA的測序反應(yīng)的原理其實就是Taq酶的聚合反應(yīng),，需要一個合適的酶反應(yīng)條件,。如果溶解DNA樣品的溶液含有過多的鹽，會影響測序反應(yīng)體系,，造成Taq酶的聚合性能下降,，干擾測序反應(yīng)甚至無法產(chǎn)生信號。

純水應(yīng)用Tips: 超純水機采用基因測序超純化柱,，RephiLe配方填料的低鎂型純化柱,，可以特異性去除水中的鎂離子，降低空白本底對測序反應(yīng)體系的影響,。

Q2：測序結(jié)果怎么沒有峰圖呢,？

原因：模板被降解，罪魁禍?zhǔn)卓赡苁菧y序使用的水中含有核酸酶,。

純水應(yīng)用Tips: 制備超純水的超純水機需要帶有終端濾器,，如樂楓生物的RephiBio終端濾器，可以去除DNA酶和RNA酶,。

Q3：為什么測序峰圖出現(xiàn)了“瀑布效應(yīng)”,？

“瀑布效應(yīng)”是基線突然從高處下降的現(xiàn)象。

原因：樣品被有機物污染,，有機物會被激發(fā)產(chǎn)生熒光,，抬高基線。

純水應(yīng)用Tips: 使用帶有TOC檢測系統(tǒng)的超純水機,如樂楓Genie系列智能超純水系統(tǒng),，有機物含量低于5 ppb,，采用全氧化法設(shè)計的TOC在線監(jiān)測系統(tǒng)，在線監(jiān)測TOC含量,，符合ISPE制藥工程指南 / 美國藥典USP等標(biāo)準(zhǔn)對于TOC檢測的要求,。

Q4：“釘子峰”如何避免？

“釘子峰”是A,、T,、C、G四個顏色的峰都被突然拔起，形成的尖銳峰形,。

原因： 溶液中可能存在氣泡或者顆粒,，氣泡和顆粒對激光全反射，形成“釘子峰”,。

純水應(yīng)用Tips: 純水機取水口配備0.22μm的終端濾器,，測序之前使用超聲波對超純水進行脫氣可以有效地防止“釘子峰”。

    樂楓生物Genie系列智能純水系統(tǒng)以穩(wěn)定的水質(zhì),、智能的操作系統(tǒng)充分滿足基因測序用水需求,，在諸多應(yīng)用到測序儀的實驗室常常會看到樂楓生物Genie系列智能超純水系統(tǒng)的身影。華大基因海外“火眼實驗室”采用的超純水機是Genie 系列的超純水系統(tǒng),。