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通過 VIDEODROP 評估 LNP 濃度示例分析
閱讀：543 發(fā)布時間：2024-12-1通過 VIDEODROP 評估 LNP 濃度示例分析
使用 VIDEODROP 進行 LNP 分析
VIDEODROP 是一種基于干涉原理的創(chuàng)新納米級成像技術(shù)，能夠在短時間內(nèi)以高重復(fù)性測量納米顆粒的尺寸和濃度,。
OneDrop & OneClick 實時測量
高再現(xiàn)性最大限度地減少測量儀之間的誤差
按原樣測量未純化和未標記的樣品
粒徑,、分散狀態(tài),、zeta 電位等是核酸藥物評價中的重要理化參數(shù)，但使用 VIDEODROP 的單顆粒測量技術(shù)監(jiān)測顆粒濃度使其變得不那么復(fù)雜,，可以收集數(shù)據(jù)以幫助標準化質(zhì)量控制,，在執(zhí)行測定步驟之前進行穩(wěn)定性評估和比較研究，并在新配方開發(fā),、制造工藝和儲存條件中有效比較顆粒計數(shù),。
因此，我們將使用VIDEODROP來比較不同條件下mRNA-LNP顆粒的數(shù)量,，并重點介紹過程或脂膜成分對轉(zhuǎn)染活性的影響的測量結(jié)果,。
圖 1. VIDEODROP 如何用于 mRNA-LNP 生產(chǎn)的圖片
LNP 顆粒濃度很重要的過程
使用 mRNA-LNP 制造納米藥物時需要評估多個項目。
在這里,，我們將針對以下四點檢查 VIDEODROP 測量和流式細胞儀對不同制造條件的樣品的測量：（1）用于合成 LNP 的試劑類型,，（2）混合 LNP 和 RNA 的速度，（3）損失由于緩沖液更換,，以及（4）由于儲存條件造成的損失,，我們比較了所使用的核酸遞送測定的結(jié)果，并評估了每個步驟中濃度測量的重要性,。
分析結(jié)果 顆粒濃度是否影響轉(zhuǎn)染活性？
脂質(zhì)成分的優(yōu)化
在該實驗中,，使用相同的工藝制造了兩種具有不同脂質(zhì)成分的LNP,，并對每個樣品進行了測量。
顆粒濃度不受脂質(zhì)組合物的影響,，但脂質(zhì)組合物 1 與脂質(zhì)組合物 2 相比顯示出更高的活性,。盡管顆粒數(shù)量幾乎相同，脂質(zhì)組合物1比脂質(zhì)組合物2更有效,。
混合速度優(yōu)化
在這里,，作為混合速度的優(yōu)化評估，我們通過改變微流體裝置上的混合速度（流速）從 2 到 18 mL/min 來比較 LNP 的濃度和轉(zhuǎn)染活性,。
盡管 LNP 本身的組成相同,，但改變混合速度對顆粒濃度和轉(zhuǎn)染活性有顯著影響。它與粒子數(shù)有直接關(guān)系,。
優(yōu)化緩沖液交換
使用切向流過濾（TFF）的緩沖液交換和濃縮步驟用于將用于LNP合成的緩沖液替換為用于施用的緩沖液,，并增加制劑的濃度并提高效價這是LNP合成中的重要步驟。
在這種情況下,，緩沖液交換步驟中的顆粒數(shù)量減少了 75%,，證實需要優(yōu)化 TFF 流程。
存儲優(yōu)化
優(yōu)化儲存條件對于確保產(chǎn)品質(zhì)量至關(guān)重要,。在本實驗中,，我們測量了儲存在 +4°C 或 -20°C 下的相同 mRNA-LNP,。
測量結(jié)果表明，與+4°C條件相比,，-20°C儲存導(dǎo)致活性下降和顆粒數(shù)量減少,。
結(jié)論
Videodrop 是一款即用型工具，只需一滴即可測量 LNP 顆粒濃度和顆粒尺寸分布,。
Videodro 可讓您快速輕松地測量濃度,，從而更好地控制制造過程。
使用納米顆粒計數(shù)標準化基于細胞的測定（轉(zhuǎn)染活性）可改善比較研究中不同條件下產(chǎn)生的 LNP 的評估
VIDEODROP是完成評估LNP質(zhì)量的分析策略的理想工具,。