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你還在為細胞計數(shù)過程中的碎片和雜質(zhì)干擾而煩惱嗎,?

閱讀:498        發(fā)布時間:2021-4-7
單細胞測序技術(scs)是指在單個細胞水平上對其攜帶的遺傳信息進行測序,,獲得某種細胞類型的基因序列等信息并進行整合分析,,目前廣泛應用于新物種鑒定,、病原篩查,、病原進化,、發(fā)育生物學、神經(jīng)科學,、腫瘤異質(zhì)性研究以及循環(huán)腫瘤細胞等,。該技術在2013年榮膺《自然-方法》年度技術。目前主要的方法為10x Genomics,。
單細胞測序技術實例
1. 多重退火和成環(huán)循環(huán)擴增技術主要研發(fā)人:哈佛大學終身教授,、美國科學院院士謝曉亮教授技術看點:降低PCR擴增偏倚,使得單細胞中93%的基因組能夠被測序,。這種方法使得檢測單細胞中較小的DNA序列變異變得更容易,,因此能夠發(fā)現(xiàn)個別細胞之間的遺傳差異。2. 基于芯片實驗室技術的單細胞測序主要研發(fā)人:斯坦福大學Stephen Quake技術看點:基于lap on a chip開發(fā)3. 基于MDA的單細胞測序主要研發(fā)人:深圳華大基因研究院技術看點:將多重置換擴增(MDA)和測序技術相結合4. Strand-seq主要研發(fā)人:加拿大英屬哥倫比亞大學Peter Lansdorp技術看點:能捕捉DNA一條鏈上的信息,,使得研究人員對于親本DNA模板鏈進行DNA測序,,避免單細胞DNA擴增和測序時丟失定向信息
收樣與樣本制備過程中的注意事項
1. 樣本類型:細胞(植物細胞需要制備成原生質(zhì)體)、組織(一般需要鮮樣不可冷凍),、血液2.最適上機檢測濃度:7x105-1.2x106個/ml3.細胞活率:細胞活率大于70%4. 細胞大?。盒∮?0μm5.細胞結團率:小于10%

  

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