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Curiosis血細(xì)胞計數(shù)板除了要會用,，還要注意這些事情！
閱讀：2675 發(fā)布時間：2020-12-11
Curiosis血細(xì)胞計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù),，是一種常用的微生物計數(shù)方法,。此法的優(yōu)點是直觀,、快速,。將經(jīng)過適當(dāng)稀釋的菌懸液（或孢子懸液）放在血細(xì)胞計數(shù)板載玻片與蓋玻片之間的計數(shù)室中，在顯微鏡下進行計數(shù),。由于計數(shù)室的容積是一定的（0.1或0.4mm2）,，所以可以根據(jù)在顯微鏡下觀察到的微生物數(shù)目來換算成單位體積內(nèi)的微生物總數(shù)目。由于此法計得的是活菌體和死菌體的總和,，故又稱為總菌計數(shù)法,。適用于稀釋的菌懸液（或孢子懸液），即液體培養(yǎng)基中菌體的計數(shù),。
Curiosis血細(xì)胞計數(shù)板操作步驟：
1．稀釋
將釀酒酵母菌懸液進行適當(dāng)稀釋,，菌液如不濃，可不必稀釋,。
2．鏡檢計數(shù)室
在加樣前,，先對計數(shù)板的計數(shù)室進行鏡檢。若有污物,，則需清洗后才能進行計數(shù),。
3．加樣品
將清潔干燥的血細(xì)胞計數(shù)板蓋上蓋玻片，再用無菌的細(xì)口滴管將稀釋的釀酒酵母菌液由蓋玻片邊緣滴一小滴（不宜過多）,，讓菌液沿縫隙靠毛細(xì)滲透作用自行進入計數(shù)室,，一般計數(shù)室均能充滿菌液。（此處浙科版課本P73有誤）注意不可有氣泡產(chǎn)生,。
4．顯微鏡計數(shù)
靜止5分鐘后,，將血細(xì)胞計數(shù)板置于顯微鏡載物臺上，先用低倍鏡找到計數(shù)室所在位置,，然后換成高倍鏡進行計數(shù),。在計數(shù)前若發(fā)現(xiàn)菌液太濃或太稀,，需重新調(diào)節(jié)稀釋度后再計數(shù)。一般樣品稀釋度要求每小格內(nèi)約有5—10個菌體為宜,。每個計數(shù)室選4或5個中格中的菌體進行計數(shù),。
鏡檢計數(shù)方法：①方格內(nèi)細(xì)胞的計數(shù)順序為左上→右上→右下→左下。②壓在方格線上的細(xì)胞只計左線和上線上的細(xì)胞數(shù),。③酵母細(xì)胞若有粘連,，要數(shù)出團塊中的每一個細(xì)胞。④出芽酵母的芽體體積若超過細(xì)胞體積的1/2,，則算獨立個體,。⑤計數(shù)總數(shù)不少于300個細(xì)胞。
5．清洗血細(xì)胞計數(shù)板
使用完畢后,，將血細(xì)胞計數(shù)板在水籠頭上用水柱沖洗,，切勿用硬物洗刷,，洗完后自行晾干或用吹風(fēng)機吹干,。鏡檢，觀察每小格內(nèi)是否有殘留菌體或其他沉淀物,。若不干凈,，則必須重復(fù)洗滌至干凈為止,。
Curiosis血細(xì)胞計數(shù)板注意事項：
（1）進行計數(shù)前，應(yīng)先將試管搖勻,，目的是使酵母菌在培養(yǎng)液中混合均勻,，以減少計數(shù)誤差。
（2）顯微鏡計數(shù)時,，對于壓在小方格界線上的酵母菌,，應(yīng)取相鄰兩邊及頂角計數(shù)。
（3）若一個小方格內(nèi)酵母菌數(shù)量過多,，難以數(shù)清時,，則可將培養(yǎng)液稀釋一定倍數(shù)后再計數(shù)。
（4）本實驗無另設(shè)對照實驗,，酵母菌每天的數(shù)量變化可形成前后對照,。
（5）血細(xì)胞計數(shù)板使用后，切勿用硬物洗刷,，可采用浸泡和沖洗的方法清洗,。