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美國MORSTE大面積紫外線燈進(jìn)行菌種誘變育種實(shí)驗(yàn)
閱讀:167 發(fā)布時(shí)間:2025-5-9XM-15S臺(tái)式紫外線燈,安裝有2根15w 254nm,,鏡面鋁合金反光板,,隔板可調(diào)臺(tái)式支架,是實(shí)驗(yàn)室紫外照射的便捷工具,。XM-15系列臺(tái)式紫外線燈支架有多個(gè)檔位可以調(diào)節(jié),,方便老師做不同距離、不同強(qiáng)度的紫外線誘變照射實(shí)驗(yàn),。
短波波長254nm的紫外線,,正好是食用菌遺傳變異物質(zhì)一核酸的吸收髙峰,菌種細(xì)胞即使受到紫外線的輕度照射,,也會(huì)使遺傳物質(zhì)一一脫氧核糖核酸(DNA)發(fā)生巨大的變化,。
常見的變化有:DNA鍵的斷麵,氫鍵飭斷裂,嘧啶的水合化,, 胸腺嘧啶二聚體的形成,,八分乇內(nèi)和分子間的交聯(lián)等。 所以,,紫外線是誘導(dǎo)食用菌,其它搟生物菌種發(fā)生變異的誘變劑,,在誘變的基礎(chǔ)上,就可能選育出優(yōu)良的菌種來,。
用XM-15S大面積紫外線燈進(jìn)行紫外線誘變育種,,首先應(yīng)準(zhǔn)備孢子懸浮液。將新鮮食用菌無菌孢子移入5毫升無菌生理食鹽水(經(jīng)滅菌處理 的0.9%溶液),,或磷酸緩沖溶液(由15克磷酸氫二鈉和2克磷酸二氫鉀共溶于1000亳升經(jīng)滅菌而得的蒸餾水)中,,搖勻后即成孢子懸浮液,萁濃度以每毫升含孢子100萬至1億 個(gè)為宜,。
誘變時(shí),在暗室內(nèi)開啟XM-15S大面積紫外線燈,,調(diào)整紫外線燈臺(tái)式支架的隔板高度,。開始先開燈20分鐘,波長穩(wěn)定后取5亳升孢子懸浮液 倒入直徑6厘米的無菌培養(yǎng)皿中,,揭開皿蓋,,搖動(dòng)培養(yǎng)皿, 使照射均勻,,照射時(shí)間0.5—1.0分鐘,,照射后的抱子懸浮液每毫升含活孢子數(shù)在10—1000萬個(gè)之間。要得到單菌落,得 先用無菌水樣釋至每亳升10—100個(gè),,再取稀釋液0.2毫升,, 涂布于裝有瓊脂的培養(yǎng)皿上,在25℃溫度下培育5—10天,, 待菌落出現(xiàn)后,,選純正、健壯的單菌落移入斜面試管培養(yǎng),, 并做拮抗試驗(yàn),。
拮抗試驗(yàn)是取處理和未處理的菌絲各一塊,接在同一斜面上,,相距1 一2厘米,,如處理后的孢子已發(fā)生變異,其菌絲與未處理的菌絲在相接處就會(huì)發(fā)生拮抗,,形成一條明顯的拮抗線,;若未發(fā)生變異,則兩方面的菌絲相連接成一體,。