詳細介紹
人中性粒細胞防御素3英文名稱:Human DEFA3 ELISA Kit產(chǎn)品別名:人DEFA3 elisa試劑盒用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清,、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human DEFA3 ELISA Kit |
貨號 | CS-E3682 |
試劑配制:
1,、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2,、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品),。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶,。
4,、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5,、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶,。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7,、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8,、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9,、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10,、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過一夜,,然后1000×g離心20 分鐘,,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,,可以對勻漿液進行超聲破碎,,或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,,取上清檢測,。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃,。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,,請廢棄。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,,會使液體沾到管壁或瓶蓋,。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液,。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應(yīng)為室溫,。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,,使用微量振蕩器,,如無微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻,。
6. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙孔檢測,。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用,!否則將影響試驗結(jié)果,。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時,,請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行,。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記糖尿病相關(guān)肽1-37Anti-CD44V6/CD44/HCAM/FITC 熒光素標(biāo)記抗CD44抗體IgG
凋亡蛋白活性因子-1(抗原)Anti-CD44v7 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠CD44V7抗體IgG
凋亡蛋白活性因子-1(抗原)Anti-CD45(LCA)/FITC 熒光素標(biāo)記CD45(白細胞共同抗原)抗體
雄激素受體(多肽抗原)Anti-CD45/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記CD45抗體 IgG
5-羥色胺受體2A抗原Anti-CD45RO/FITC 熒光素標(biāo)記CD45RO抗體IgG
人中性粒細胞防御素3ELISA試劑盒凝血酶Ⅱ(凝血因子II)抗原Anti-CD46/MCP /FITC 熒光素標(biāo)記膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗體(人)IgG
5-羥色胺受體3抗原Anti-CD46/MCP /FITC 熒光素標(biāo)記膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗體IgG
5-羥色胺受體4抗原Anti-CA125/Biotin 生物素標(biāo)記兔抗人CA125抗原抗體IgG
粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗原Anti-CD48/SLAMF2/FITC 熒光素標(biāo)記CD48抗體IgG
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗原Anti-CD44/PE 熒光素PE標(biāo)記CD44抗體IgG
血管緊張素原(抗原)Anti-CD45/PE 熒光素PE標(biāo)記兔抗人,、小鼠CD45抗體IgG
5-脂氧合酶抗原Anti-CD133/Biotin 生物素化造血干細胞抗原CD133抗體
辣根過氧化物酶標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗原Anti-CD55/DAF/FITC 熒光素標(biāo)記衰變加速因子CD55抗體IgG
載脂蛋白E(抗原)Anti-CD56/FITC 熒光素標(biāo)記CD56抗體IgG
1,4-二羥基-9,10-蒽二Anti-CD56/NCAM1/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)細胞粘附分子1抗體IgG 炔草酸人骨形成蛋白elisa試盒
伏蟲隆 人膽酸甘油酯elisa試盒
伏殺硫人阿米巴elisa試盒
草滅平人B細胞淋巴瘤因子3elisa試盒
華法林人沙眼衣原體抗體elisa試盒
氟草胺人金屬蛋白酶組織抑制因子-3elisa試盒
草人結(jié)合珠蛋白elisa試盒
2,5-二-3-基苯酸豬組織型纖溶酶原激活elisa試盒
氟禾靈豬組織因子elisa試盒
2-[4-(3--5-三氟基-2-啶氧基)苯氧基]酸酯人軍團菌抗體IgM ELISA
氟禾靈雞白介素4 ELISA
乳氟禾草靈 精氟禾草靈
?操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl,;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl,。
(2)酶標(biāo)板置4℃,,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,,浸泡1-2分鐘,,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復(fù)洗滌3-4次,。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl,。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min。
(6)洗板,,同(4),。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min,。
(9)洗板,同(4),。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,,置37℃暗處反應(yīng)15-20min,。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,,計算S/N值,。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。