詳細(xì)介紹
試劑配制:
1,、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔),。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品),。
3,、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4,、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶,。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶,。
6,、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8,、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9,、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10,、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
?人脂肪分化相關(guān)蛋白英文名稱:Human ADRP ELISA Kit產(chǎn)品別名:人ADRP elisa試劑盒用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human ADRP ELISA Kit |
貨號 | CS-E3692 |
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl,;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl,。
(2)酶標(biāo)板置4℃,,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,,浸泡1-2分鐘,間歇搖動,。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl,。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min,。
(6)洗板,,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min,。
(9)洗板,同(4),。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min,。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng),。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾,。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值,。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn),。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過一夜,然后1000×g離心20 分鐘,,取上清即可,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,,并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細(xì)胞,,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,,取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
酸Anti-CK5/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞角蛋白5抗體IgG
核黃素Anti-PCNA(phosphos Dyr211)/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、小鼠,、大鼠、牛,、兔,、羊、雞酸化增殖細(xì)胞核抗原抗體IgG
維生素12Anti-CK5/6 /FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞角蛋白5/6抗體IgG
鹽酸硫胺Anti-CK7/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞角蛋白7抗體IgG
偶氮二環(huán)己基腈Anti-CK7/FITC 熒光素標(biāo)記抗細(xì)胞角蛋白7抗體(大,、小鼠)IgG
人脂肪分化相關(guān)蛋白ELISA試劑盒偶氮二異戊腈Anti-CK10/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞角蛋白10抗體IgG
偶氮二異庚腈Anti-CK10/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記細(xì)胞角蛋白10抗體IgG
凡士林Anti-CK14/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗細(xì)胞角蛋白14抗體IgG
白凡士林Anti-CK15/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞角蛋白15抗體IgG
香草Anti-CK16/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞角蛋白16抗體IgG
萬古霉素鹽酸鹽Anti-CK17/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞角蛋白17抗體IgG
基霉素Anti-Phospho-Cytokeratin 17 (Ser44) /FITC 熒光素標(biāo)記酸化細(xì)胞角蛋白17抗體IgG
有效霉素Anti-CK18/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞角蛋白18抗體IgG
戊酸Anti-CK18(C-term) /FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞角蛋白18抗體(C端)IgG
視黃醇Anti-CK18/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞角蛋白18抗體IgGHPLC≥98%Dickkopf 1檢測試盒20mg8-oxoG
HPLC≥98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試盒<鞣花含Cacl2>5mgPRNP
phospho-Brk (Tyr447)英文名稱:ARP2/3 subunit 1B兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)免疫試盒
HPLC≥98%Dicer-1 ELISA試盒20mgOATP1B1
HPLC≥98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試盒<白陶土含Cacl2>5mgSMAD-2 英文名稱標(biāo)準(zhǔn)品兔子纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA Kit,,48T/96T 20mg
Nrf2 peptide英文名稱:異質(zhì)核糖核蛋白K抗體
HPLC≥98%DAB2互作蛋白檢測試盒20mgOATP1B3
英文名稱對照品人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA Kit,48T/96T 20mg
NRF-1(nuclear respiratory factor-1)英文名稱:名異質(zhì)核糖核蛋白L抗體
注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃,。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,,請廢棄。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,,會使液體沾到管壁或瓶蓋,。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液,。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應(yīng)為室溫,。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,,使用微量振蕩器,,如無微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻,。
6. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙孔檢測,。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用,!否則將影響試驗結(jié)果,。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時,,請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行,。