化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
火雞沙門氏菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品,， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs,、MgCl2,、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑,、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途,。
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品特征:
靈敏度高：能對(duì)低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量,。
特異性強(qiáng)：采用熱啟動(dòng)酶的激活機(jī)制，抑制非特異性擴(kuò)增 ,。
重復(fù)性好：擴(kuò)增曲線重合度高,，受干擾影響少。
擴(kuò)增效率高：擴(kuò)增曲線Ct值低,，起峰快,，效率高。
原理:
所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Salmonella meleagridis |
貨號(hào) | CP934684 |
火雞沙門氏菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞,，室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋,。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,，混勻后15到30℃孵育10分鐘后,，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液,，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀,?；靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,，測定RNA溶液 濃度和純度,。
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料,，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,，發(fā)射熒光信號(hào)，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào),，從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時(shí),，產(chǎn)品僅用于科研報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時(shí),，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),，即每擴(kuò)增一條DNA鏈,，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平,、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀,、組織研磨器,、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL,、20µL,、200 µL、1000 µL）,。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管,、眼科剪、眼科鑷,、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管,、吸頭（10 µL,、200 µL、1000 µL）,、滅菌雙蒸水,。
具有下列特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板,，操作簡單,，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,，特異性強(qiáng),。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳,。
4. 提供陽性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果,。
以下是火雞沙門氏菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
RHCG RH血型C糖蛋白抗體人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試盒
RHCE Rh血型C抗原抗體人CC趨化因子7 (CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7)ELISA試盒
RHBDD3 垂體瘤細(xì)胞凋亡抗體人CC趨化因子5(CCL5/D17S136E/SCYA5)ELISA試盒
RGS5 G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子5抗體人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)ELISA試盒
RGS4 精神分裂癥相關(guān)蛋白9抗體人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA試盒
RGS2 G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)ELISA試盒
RGS19 G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體人cAMP和cAMP抑制cGMP 3',5'循環(huán)酸二酯酶10A(PDE10A)ELISA試盒
RGC32 補(bǔ)體應(yīng)答基因32抗體人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試盒
火雞沙門氏菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒RGAG4 RGAG4蛋白抗體人Ca2+激活K+通道蛋白2(KCNN2)ELISA試盒
RFTN2 RFTN2蛋白抗體人C4結(jié)合蛋白(C4BP)ELISA試盒
RFPL4B/RNF211 環(huán)指蛋白211抗體人C1q/TNF相關(guān)蛋白3(Cartonectin/CTRP3/CORS-26)ELISA試盒
RFPL4A/RNF210 環(huán)指蛋白210抗體人B因子(BF)ELISA試盒
RFPL2/RFPL3 RET指蛋白樣2/3抗體人B細(xì)胞受體相關(guān)蛋白31(BCAP31)ELISA試盒
Rffl/RING finger protein 189 環(huán)指蛋白189抗體人B細(xì)胞生長因子(BCGF)ELISA試盒
RFESD RFESD蛋白抗體人B細(xì)胞淋巴瘤因子6(Bcl6)ELISA試盒豬細(xì)小病PCR檢測試盒低溫運(yùn)輸,，-20℃保存50T
豬瘟病RT-PCR試盒Classical Swine Fever Virus RT-PCR Kit低溫運(yùn)輸,，-20℃保存50T
豬托克特諾病PCR檢測試盒低溫運(yùn)輸，-20℃保存50T
豬特定基因序列PCR檢測試盒低溫運(yùn)輸,，-20℃保存50T
豬水泡性口炎病PCR檢測試盒低溫運(yùn)輸,，-20℃保存50T
豬皰疹病PCR檢測試盒低溫運(yùn)輸，-20℃保存50T
豬牛絳蟲PCR檢測試盒低溫運(yùn)輸,，-20℃保存50T
豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病前病PCR檢測試盒低溫運(yùn)輸,，-20℃保存50T
豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病PCR檢測試盒低溫運(yùn)輸，-20℃保存50T
豬腦心肌炎病PCR檢測試盒低溫運(yùn)輸,，-20℃保存50T