詳細介紹
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl,;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl,。
(2)酶標板置4℃,包被過夜,。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),,之后將洗滌液注滿板孔,,浸泡1-2分鐘,間歇搖動,。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl,。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min,。
(6)洗板,,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl,。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min,。
(9)洗板,,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min,。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾,。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準,。
人吲哚胺英文名稱:Human indoleamine(INDO autoantibody ELISA kit產(chǎn)品別名:人INDO 自身抗體elisa試劑盒用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標本,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human indoleamine(INDO autoantibody ELISA kit |
貨號 | CS-E3732 |
試劑配制:
1,、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔),。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品),。
3,、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4,、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶,。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶,。
6,、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8,、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4),。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過一夜,,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融,。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,,并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,,或反復凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測,。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融,。
注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃。復溶后的標準品若未用完,,請廢棄,。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋,。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應為室溫,。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應終止液除外),。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻Y(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器,,如無微量振蕩器,,可在反應孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測,。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,,嚴禁在不同的液體之間混用,!否則將影響試驗結(jié)果。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作,。特別是檢測血液或者其他體液標本時,,請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
碲(IV)酸鉀Anti-GPR14/FITC 熒光素標記G蛋白偶聯(lián)受體14抗體IgG
酒石酸二鉀半水合物Anti-GPR30/FITC 熒光素標記G蛋白偶聯(lián)受體30抗體IgG
無水硫化鉀Anti-G Protein/FITC 熒光素標記G蛋白/鳥苷酸結(jié)合蛋白抗體IgG
十八酸鉀Anti-GRP78/FITC 熒光素標記G蛋白偶聯(lián)受體78抗體IgG
2,,4-己二烯酸鉀Anti-GR /FITC 熒光素標記糖皮質(zhì)激素受體抗體IgG
洛瑟爾氏鹽Anti-GPNMB/Osteoactivin/FITC 熒光素標記GPNMB抗體IgG
偏硅酸鉀Anti-Phospho-Glucocorticoid Receptor (Ser211) /FITC 熒光素標記兔抗人,、大、小鼠酸化糖皮質(zhì)激素受體抗體IgG
酸鉀Anti-GRB2/ASH /FITC 熒光素標記生長因子受體結(jié)合蛋白2抗體IgG
人吲哚胺ELISA試劑盒焦酸四鉀Anti-GPR109A/HM74A/FITC 熒光素標記G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體IgG
銻(V)酸鉀Anti-GRB10/FITC 熒光素標記兔抗人,、大,、小鼠生長因子受體結(jié)合蛋白10抗體IgG
化鉑鉀Anti-Phospho-GRB10 (Tyr67) /FITC 熒光素標記兔抗人、大,、小鼠酸化生長因子受體結(jié)合蛋白10抗體IgG
一鹽基酸鉀Anti-GrB(Granzyme B)(AA 18-29)/FITC 熒光素標記顆粒酶B抗體IgG
無水酸二鉀Anti-gremlin/FITC 熒光素標記骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白抗體IgG
1,4,5,6-四-4,6-二氧-1,3,5-三嗪-2-羧酸鉀Anti-GRGDS/FITC 熒光素標記抗粘附多肽抗體IgG
二酸鉀Anti-GRO Alpha/FITC 熒光素標記兔抗生長調(diào)節(jié)致癌基因α抗體IgG英文名稱標準品大鼠游離(F-TESTO)ELISA Kit,,48T/96T 100mg
Cenexin1英文名稱:ASC人型肝炎病X原(HBxAg)免疫試盒
Phospho-Bad (Ser155)英文名稱:phospho-ATF2(Thr71)小鼠4-羥基壬烯(HNE)免疫試盒
英文名稱標準品犬(T)ELISA Kit,48T/96T 200mg
C5orf19 英文名稱:Afadin人型肝炎病X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)免疫試盒 英文名稱標準品大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit,,48T/96T 1g
hCG beta英文名稱:ATF5小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)免疫試盒
HPLC≥98%B細胞淋巴瘤-XL檢測試盒5mgRA1
英文名稱標準品兔子免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit,,48T/96T 200mg
BK channel英文名稱:ATF6 beta小鼠Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)免疫試盒