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上海莼試生物技術(shù)有限公司 |
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人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白G英文名稱：hnRNP G ELISA Kit產(chǎn)品別名：人hnRNP G elisa試劑盒用于測(cè)定血清,，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清,、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | hnRNP G ELISA Kit |
貨號(hào) | CS-E3742 |
試劑配制：
1,、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2,、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）,。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶,。
4,、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5,、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶,。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7,、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8,、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9,、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶,，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10,、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）,。
樣本處理及要求：
1. 血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過一夜，然后1000×g離心20 分鐘,，取上清即可,，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè),，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比,，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中,，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,，或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,，取上清檢測(cè),。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請(qǐng)1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè),，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)：
1.使用前請(qǐng)保存在2-8℃,。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,，請(qǐng)廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置,，會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋,。因此使用前請(qǐng)1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?，F(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液,。
（加熱溫度不要超過50℃）使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫,。
4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,，使用微量振蕩器,，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻,。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙孔檢測(cè),。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用,！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果,。
8. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液標(biāo)本時(shí),，請(qǐng)按國家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行,。
以下是公司正在*的產(chǎn)品：
5-羧基熒光素（單一化合物）Anti-HIV gp120/FITC 熒光素標(biāo)記艾滋病病抗體IgG
5-羧基熒光素（單一化合物）Anti-HIV-1 ENV (gp160) antigen/FITC 熒光素標(biāo)記艾滋病病-1包膜糖蛋白抗體IgG
6-羧基熒光素（單一化合物）Anti-HIV-1 ENV (gp160) antigen/FITC 熒光素標(biāo)記艾滋病病-1包膜糖蛋白抗體IgG
6-羧基熒光素（單一化合物）Anti-HisX6/6His/His tag(CT) /FITC 熒光素標(biāo)記聚組酸抗體/抗His tag（C端）標(biāo)簽抗體IgG
6-羧基熒光素（單一化合物）Anti-HisX6/6His/His tag(CT)/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記聚組酸抗體/抗His tag標(biāo)簽抗體（C端）IgG
5(6)-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（混合物）Anti-HLA-DR/FITC 熒光素標(biāo)記HLA-DR抗原抗體IgG
5(6)-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（混合物）Anti-HLA-E/FITC 熒光素標(biāo)記人類白細(xì)胞抗原EIgG
5(6)-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（混合物）Anti-HLA-G/FITC 熒光素標(biāo)記人類白細(xì)胞抗原G/組織相容性白細(xì)胞抗原G抗體IgG
5-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（單一化合物）Anti-HMGA1/FITC 熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白A1抗體IgG
5-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（單一化合物）Anti-HMGA2/FITC 熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白A2抗體IgG
5-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（單一化合物）Anti-HMGB1/FITC 熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白B1抗體IgG
6-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（單一化合物）Anti-HMGB4/FITC 熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白B4抗體IgG
6-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（單一化合物）Anti-HNF-1 Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記肝細(xì)胞核因子1α抗體IgG
6-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（單一化合物）Anti-HO-1/HSP32/FITC 熒光素標(biāo)記血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗體IgG
異硫氰酸熒光素Anti-HO-1/HSP32/FITC 熒光素標(biāo)記血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗體IgG英文名稱對(duì)照品牛雌二(E2)ELISA Kit，48T/96T 1g
人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白GELISA試劑盒C7ORF50英文名稱：Bcl-2 alpha人脫酶(ADH)免疫試盒
B7-H6英文名稱：ABH8小鼠白介素18(IL-18)免疫試盒
HPLC≥98%A激酶PRKA錨定蛋白12檢測(cè)試盒5mgAMCA
C7orf53英文名稱：BAT5人胺呋(AD)免疫試盒
BOb-1英文名稱：ABI3BP小鼠白介素17(IL-17)免疫試盒
HPLC≥98%AT豐富結(jié)合域1A檢測(cè)試盒5mgALCA
C7orf59英文名稱：BTBD1人胰脂肪酶(PL)免疫試盒 英文名稱工作標(biāo)準(zhǔn)品猴可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA Kit，48T/96T 200mg
BIN1英文名稱：ARHGAP20小鼠白介素16(IL-16)免疫試盒
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔,；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl,；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃,，包被過夜,。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后,，即甩去）,，之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘,，間歇搖動(dòng),。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次,。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),，孵育60min,。
（6）洗板，同（4）,。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl,。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min,。
（9）洗板,，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl,，輕輕混勻10s,，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng),。
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾,。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后,，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn),。
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