詳細介紹
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,,每種樣品設(shè)3個平行孔,;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl,;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl,。
(2)酶標板置4℃,,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,,浸泡1-2分鐘,,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復(fù)洗滌3-4次,。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min。
(6)洗板,,同(4),。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl,。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min。
(9)洗板,同(4),。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,,輕輕混勻10s,,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng),。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾,。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準,。
人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白D英文名稱:hnRNP D ELISA Kit產(chǎn)品別名:人hnRNP D elisa試劑盒用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標本,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | hnRNP D ELISA Kit |
貨號 | CS-E3744 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔),。
2,、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶,。
4,、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5,、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶,。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7,、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8,、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9,、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10,、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過一夜,,然后1000×g離心20 分鐘,,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,,并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細胞,,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,,取上清檢測。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃,。復(fù)溶后的標準品若未用完,,請廢棄。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,,會使液體沾到管壁或瓶蓋,。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液,。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應(yīng)為室溫,。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,,使用微量振蕩器,,如無微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻,。
6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測,。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴禁在不同的液體之間混用,!否則將影響試驗結(jié)果,。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標本時,,請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行,。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
5-(6)-羧基羅丹明110琥珀酰亞胺酯(混合物)Anti-HSL/FITC 熒光素標記荷爾蒙敏感脂肪酸抗體IgG
5-羧基羅丹明110琥珀酰亞胺酯(單一化合物)Anti-Phospho-HSL (Ser552)/FITC 熒光素標記酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體IgG
6-羧基羅丹明110琥珀酰亞胺酯(單一化合物)Anti-Phospho-HSL (Ser563) /FITC 熒光素標記酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體IgG
5(6)-羧基四基羅丹明(混合物)Anti-Phospho-HSL (Ser565) /FITC 熒光素標記酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體IgG
5(6)-羧基四基羅丹明(混合物)Anti-Phospho-HSL (Ser660)/FITC 熒光素標記酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體IgG
5(6)-羧基四基羅丹明(混合物)Anti-HSP-20/FITC 熒光素標記熱休克蛋白-20抗體IgG
人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白DELISA試劑盒5-羧基四基羅丹明(單一化合物)Anti-HSP22/FITC 熒光素標記熱休克蛋白-22抗體IgG
5-羧基四基羅丹明(單一化合物)Anti-HSP-27/FITC 熒光素標記HSP-27蛋白抗體IgG
5-羧基四基羅丹明(單一化合物)Anti-HSP-47/FITC 熒光素標記熱休克蛋白-47蛋白抗體IgG
6-羧基四基羅丹明(單一化合物)Anti-HSP-60/FITC 熒光素標記熱休克蛋白-60蛋白抗體IgG
6-羧基四基羅丹明(單一化合物)Anti-HSP-70/FITC 熒光素標記HSP-70蛋白抗體IgG
6-羧基四基羅丹明(單一化合物)Anti-HSP75/TRAP-1 /FITC 熒光素標記熱休克蛋白-75抗體IgG
5(6)-羧基四基羅丹明琥珀酰亞胺酯(混合物)Anti-OMPC/OMPA/FITC 熒光素標記抗大腸桿菌外膜孔道蛋白C抗體IgG
5(6)-羧基四基羅丹明琥珀酰亞胺酯(混合物)Anti-HSP-90 Alpha/FITC 熒光素標記HSP-90α蛋白抗體IgG
5(6)-羧基四基羅丹明琥珀酰亞胺酯(混合物)Anti-HSP-90 Alpha/FITC 熒光素標記熱休克蛋白90α抗體IgGHPLC≥98%apelin 12檢測試盒5mgFH
英文名稱標準品雞可溶性E選擇(sE-selectin)ELISA Kit,48T/96T 10mg
PAK7/PAK5/MBT英文名稱:GRP( Gastrin Releasing Peptide )肝細胞核因子1β/HNF-1β抗體
HPLC≥98%AP-5復(fù)合物β亞檢測試盒5mgCH25H 英文名稱對照品犬雌二(E2)ELISA Kit,,48T/96T 1ml
英文名稱標準品人可溶性E選擇(sE-selectin)ELISA Kit,,48T/96T 200mg
PAR-1 (Protease-activated receptors-1)英文名稱:BSA(標準)HHLA3蛋白抗體
英文名稱對照品人雌二(E2)ELISA Kit,48T/96T 1ml
英文名稱標準品小鼠可溶性E選擇(sE-selectin)ELISA Kit,,48T/96T 200mg
PAR-2 (Protease-activated receptors-2)英文名稱:MBP (Myelin Basic Protein, Rat)peptideHHIP樣蛋白2抗體