詳細介紹
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔,;設(shè)兩個陰性對照孔,,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,,加入純細胞裂解液100μl,。
(2)酶標板置4℃,包被過夜,。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),,之后將洗滌液注滿板孔,,浸泡1-2分鐘,間歇搖動,。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl,。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min。
(6)洗板,,同(4),。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min。
(9)洗板,,同(4),。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,,置37℃暗處反應(yīng)15-20min,。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,,計算S/N值,。S/N≥2.1為陽性判定標準。
人髓鞘相關(guān)糖蛋白英文名稱:MAG ELISA Kit產(chǎn)品別名:人MAG elisa試劑盒用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | MAG ELISA Kit |
貨號 | CS-E3972 |
試劑配制:
1,、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2,、標準品(Standard):2瓶(凍干品),。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶,。
4,、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5,、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶,。
6,、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8,、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4),。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過一夜,,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復凍融,。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),,稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,,于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,,或反復凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測,。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復凍融,。
注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃。復溶后的標準品若未用完,請廢棄,。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,,會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象,,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液,。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外),。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,,使用微量振蕩器,如無微量振蕩器,,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測,。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,,嚴禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗結(jié)果,。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作,。特別是檢測血液或者其他體液標本時,請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行,。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
石蠟切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)摩羅利 (mallory)染色試盒Activin A 人活化素 A
冰凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)摩羅利 (mallory)染色試盒ALCAM 人白細胞活化粘附因子
石蠟切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)格莫瑞(Gomori)染色試盒cAMP 人環(huán)-酸腺苷
冰凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)格莫瑞(Gomori)染色試盒ANG 人血管緊張素
石蠟切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)改良格莫瑞三色(MGT) 染色試盒BCL-2(humen) 人細胞凋亡相關(guān)基因BCL-2
冰凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)改良格莫瑞三色(MGT)染色試盒P-Cadherin 人P-鈣粘附蛋白
石蠟切片彈性纖維(ELASTIC)米勒(MIILER)染色試盒Calcitonin 人降鈣素
冰凍切片彈性纖維(ELASTIC)米勒(MIILER)染色試盒AMA(Anti-mitochon-drial Anti-body) 人抗線粒體抗體
石蠟切片彈性纖維(ELASTIC)偉郝夫范吉森(Verhoeff-Van Gieson)染色試盒adiponectin(humen) 人脂聯(lián)素
人髓鞘相關(guān)糖蛋白ELISA試劑盒冰凍切片彈性纖維(ELASTIC)偉郝夫范吉森(Verhoeff-Van Gieson)染色試盒ET-1 人內(nèi)皮素
石蠟切片彈性纖維(ELASTIC)馬森(MASSON)染色試盒Humen I-PTH 人全段狀腺旁激素
冰凍切片彈性纖維(ELASTIC)馬森(MASSON)染色試盒Bax(humen) 人細胞凋亡相關(guān)基因Bax
石蠟切片膠原纖維(MASSON)染色試盒BCL-2(humen) 人細胞凋亡相關(guān)基因BCL-2
冰凍切片膠原纖維(MASSON)染色試盒NR1/NMDAR1 human 人N-基-D-天冬酸受體-1
石蠟切片膠原纖維(SIRIUS RED)染色試盒Human PAF (plateletactivating factor) 人血小板活化因子Bovine PGF2α(Prostaglandin F2α) ELISA Kit
Bovine PGF2α(Prostaglandin F2α) ELISA KitCAMTA1英文名稱:BIN2人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復合體(VE-cad)免疫試盒
英文名稱:C14ORF140心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5體
SLC34A2英文名稱:UBE2UGADD153抗體
CDK5RAP3英文名稱:Brain protein CG6人血管緊張轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)免疫試盒
英文名稱:CHAC2指(趾)關(guān)節(jié)粘連NOG蛋白體 98%100TApaf-1
SOCS3英文名稱:Ube2L6G蛋白偶聯(lián)受體57抗體
CENPH英文名稱:BFSP2人血管緊張原(aGT)免疫試盒
98%100TTFEB
Smad2英文名稱:Ube2HGSK-3結(jié)合蛋白FRAT2抗體