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上海莼試生物技術(shù)有限公司 |
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—— 銷售熱線 ——
13585831301 |
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔,，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl,；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl,。
（2）酶標(biāo)板置4℃,，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后,，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔,，浸泡1-2分鐘,，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復(fù)洗滌3-4次,。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl,。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),，孵育60min。
（6）洗板,，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl,。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),，孵育60min。
（9）洗板,，同（4）,。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s,，置37℃暗處反應(yīng)15-20min,。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2）,，以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后,，計(jì)算S/N值,。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
人維生素D結(jié)合蛋白英文名稱：Human DBP ELISA Kit產(chǎn)品別名：人DBP elisa試劑盒用于測定血清,，血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human DBP ELISA Kit |
貨號 | CS-E3912 |
試劑配制：
1,、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）,。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）,。
3,、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4,、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶,。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶,。
6,、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8,、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶,。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶,，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）,。
樣本處理及要求：
1. 血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過一夜,，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可,，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果）,，稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比,，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,，并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,，取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請1000×g離心20分鐘,，取上清即可檢測,，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
注意事項(xiàng)：
1.使用前請保存在2-8℃,。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請廢棄,。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置,，會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象,，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液,。
（加熱溫度不要超過50℃）使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）,。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器,，如無微量振蕩器,，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙孔檢測,。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用,，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果,。
8. 試驗(yàn)中請穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作,。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時，請按國家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行,。
以下是公司正在*的產(chǎn)品：
蛋白飽和溶液CG6856-PA peptide CG6856-PA抗原
動物細(xì)胞蛋白融解液CGA(Chromogranin A) 嗜鉻粒素A抗原
細(xì)菌蛋白融解液CGB(Chromogranin B) 嗜鉻粒素B抗原
蛋白儲存液ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor) 蕈型酰膽受體M1抗原
蛋白變性液ChRM3 peptide 蕈型酰膽受體M3抗原
膜蛋白溶解緩沖液CK18(Cytokeratin 18) 細(xì)胞角蛋白18(多肽)
鹽析法大量蛋白濃縮沉淀試盒CK18 peptide 細(xì)胞角蛋白18多肽抗原
三醋酸小量蛋白濃縮沉淀試盒CK18(Cytokeratin 18) 細(xì)胞角蛋白18抗原（C端）
蛋白定量樣品預(yù)處理試CK14/17/42/10 peptide 細(xì)胞角蛋白14抗原
同位素核酸－蛋白結(jié)合凝膠電泳定量分析（McKay）試盒CK16(Cytokeratin 16) 細(xì)胞角蛋白16抗原
人維生素D結(jié)合蛋白ELISA試劑盒5’末端DNA探針同位素（[γ32P]ATP）激酶標(biāo)記試盒CK17(Cytokeratin 17) 細(xì)胞角蛋白17抗原
蛋白體復(fù)合物制備試盒CK19 細(xì)胞角蛋白19多肽抗原
同位素核酸蛋白結(jié)合反應(yīng)試盒CK1/8/19 (Cytokeratin1/8/19; Keratin 1/8/19)peptide 細(xì)胞角蛋白1/8/19抗原
凝膠遷移電泳分析試盒CK2(casein kinase 2) 細(xì)胞角蛋白2抗原
生物素核酸－蛋白結(jié)合凝膠電泳定量分析（McKay）試盒CK5(Cytokeratin 5) 細(xì)胞角蛋白5抗原HRP conjugated Mouse Anti-Rabbit IgG Heavy Chain Specific
HRP conjugated Mouse Anti-Rabbit IgG Heavy Chain Specific英文名稱對照品小鼠質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9)ELISA Kit,，48T/96T 200mg
ZNF354C英文名稱：TAS1R3半胱蛋白酶8相關(guān)蛋白2體
C4orf40英文名稱：ASIC3兔骨鈣素/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試盒
英文名稱對照品豬質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA Kit,，48T/96T 15mg
ZNF312英文名稱：TERT叉蛋白F1體
Cullin 3英文名稱：Aspartate beta hydroxylase兔骨保護(hù)素(OPG)免疫試盒
英文名稱對照品大鼠質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9) ELISA Kit，48T/96T 15mg
ZNF268英文名稱：TOP2A高嗜性粒細(xì)胞綜合癥相關(guān)蛋白FIP1L1體 英文名稱：Biotin/BSA丸發(fā)育相關(guān)蛋白體
CDC40英文名稱：AVPR2兔鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)免疫試盒
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