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產(chǎn)品簡介
豬乳頭瘤病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品,， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs,、MgCl2,、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強劑,、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應(yīng),，具有廣泛的用途。
詳細介紹
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Swine Papillomavirus |
貨號 | CP934772 |
產(chǎn)品特征:
豬乳頭瘤病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進行定量,。
特異性強：采用熱啟動酶的激活機制,，抑制非特異性擴增 。
重復性好：擴增曲線重合度高,，受干擾影響少,。
擴增效率高：擴增曲線Ct值低，起峰快,，效率高,。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中,，加入過量SYBR熒光染料,，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，發(fā)射熒光信號,，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時,，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收,；PCR擴增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈,，就有一個熒光分子形成,，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞,，室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后,，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,，使其*溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度,。
以下是豬乳頭瘤病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
phospho-PTK9/TWF1(Tyr321) 酸化蛋白酪氨酸激酶9抗體魚鈣調(diào)酸酶(CaN)ELISA試盒
phospho-PTK2(Tyr576+Tyr577) 酸化粘著斑激酶抗體魚酚氧化酶(PO)ELISA試盒
Phospho-PTEN(Ser385) 酸化腫瘤抑制基因PTEN抗體魚多巴胺(DA)ELISA試盒
Phospho-PTEN(Ser380/Thr382/Thr383) 酸化腫瘤抑制基因PTEN抗體魚膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試盒
Phospho-PTEN(Ser380) 酸化腫瘤抑制基因PTEN抗體魚催乳素(PRL/LTH)ELISA試盒
Phospho-PSD95 (Tyr236/Tyr240) 酸化突觸后密度蛋白95抗體魚促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試盒
Phospho-PSD93 (Tyr340) 酸化突觸后密度蛋白93抗體魚促狀腺素(TSH)ELISA試盒
phospho-Proteasome 20S beta 7(Ser214) 酸化蛋白酶體PSMβ7抗體魚雌二醇(E2)ELISA試盒
Phospho-Progesterone Receptor(Ser190) 酸化孕激素受體抗體魚超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試盒
phospho-PRL(Ser163) 酸化泌乳素抗體魚補體蛋白4(C4)ELISA試盒
豬乳頭瘤病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒phospho-PRKD3(Ser41) 酸化蛋白激酶C nu型抗體魚補體蛋白3(C3)ELISA試盒
phospho-PRKD1(Tyr463) 酸化蛋白激酶C mu型抗體魚胞漿型脂酶A2A(cPLA2A)ELISA試盒
phospho-PRKD1(Ser742) 酸化蛋白激酶C mu型抗體魚白三烯B4(LTB4)ELISA試盒
phospho-PRKD1(Ser738) 酸化蛋白激酶C mu型抗體魚白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試盒
phospho-PRKCZ(Thr500) 酸化蛋白激酶C(T500)抗體魚白介素6(IL-6)ELISA試盒硼酸Boric Acid室溫保存500g
硼化氰鈉Sodium Cyanoborohydride 室溫陰涼干燥保存5g
胚胎裂解液Embryonic Cell Lysis Solution4℃保存1mL
諾沃克病PCR檢測試盒低溫運輸,，-20℃保存50T
瘧原蟲PCR檢測試盒低溫運輸，-20℃保存50T
牛錐蟲PCR檢測試盒低溫運輸,，-20℃保存50T
牛胰島素Insulin From Bovine Pancreas-20℃保存25mg
牛血清白蛋白封堵液BSA Blocking Solution-20℃保存250mL
牛血清白蛋白標準品,，2mg/mLBSA Standard-20℃保存1mL
牛血清白蛋白Albumin From Bovine Serum4℃保存5g
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機,、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器,、-20 ℃冰箱,、可調(diào)移液器（2 µL、20µL,、200 µL,、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管,、眼科剪,、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管,、吸頭（10 µL,、200 µL、1000 µL）,、滅菌雙蒸水,。
具有下列特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板,，操作簡單,，定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,，特異性強,。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳,。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果,。產(chǎn)品僅用于科研