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50T-島青霉探針法熒光定量PCR檢測試劑盒
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貨物所在地: 上海上海市
產(chǎn)地: 進口、國產(chǎn)
更新時間: 2025-03-26 21:00:08
期: 2025年3月26日--2025年9月26日
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(聯(lián)系我們,,請說明是在 化工儀器網(wǎng) 上看到的信息,謝謝?。?/p>

產(chǎn)品簡介

島青霉探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶,、dNTPs,、MgCl2、反應(yīng)緩沖液,、PCR 增強劑,、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應(yīng),,具有廣泛的用途,。

詳細介紹

產(chǎn)品名稱

島青霉探針法熒光定量PCR檢測試劑盒

英文名稱

Penicillium islandicum

貨號

CP934580

產(chǎn)品特征:

島青霉探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高:能對低拷貝或多樣性模板進行定量。
特異性強:采用熱啟動酶的激活機制,,抑制非特異性擴增 ,。
重復(fù)性好:擴增曲線重合度高,受干擾影響少,。
擴增效率高:擴增曲線Ct值低,,起峰快,效率高,。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù),,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法,。產(chǎn)品僅用于科研
檢測方法:
1.Ⅰ法:
在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR熒光染料,,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收,;PCR擴增時,,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。
熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),,清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,,測定RNA溶液 濃度和純度。
以下是
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醋酸去氨加壓素雜質(zhì)I Desmopressin Acetate Impurity I5mg/支,鑒別和系統(tǒng)適用性測定用

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需要自備的器材:

1.儀器:分析天平,、離心機、熒光 PCR 擴增儀,、組織研磨器,、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL,、20µL,、200 µL、1000 µL),。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管,、眼科剪、眼科鑷,、生理鹽水,、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL,、200 µL,、1000 µL)、滅菌雙蒸水,。
具有下列特點:
1.即開即用,,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,,定量準(zhǔn)確快速,。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp,。
3. PCR mix 中含上樣染料,,PCR 后可以直接上樣電泳,。
4. 提供陽性對照,,便于分析試驗結(jié)果。產(chǎn)品僅用于科研


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