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產(chǎn)品簡介
*線蟲通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶,、dNTPs,、MgCl2、反應(yīng)緩沖液,、PCR 增強(qiáng)劑,、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),，具有廣泛的用途,。
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Nematodirus spp. |
貨號 | CP934524 |
產(chǎn)品特征:
*線蟲通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強(qiáng)：采用熱啟動酶的激活機(jī)制,，抑制非特異性擴(kuò)增 ,。
重復(fù)性好：擴(kuò)增曲線重合度高,，受干擾影響少。
擴(kuò)增效率高：擴(kuò)增曲線Ct值低,，起峰快,，效率高。
原理:
所謂實(shí)時熒光定量PCR技術(shù),，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。產(chǎn)品僅用于科研
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中,，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,，發(fā)射熒光信號,，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時,，報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時,，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,，使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,，即每擴(kuò)增一條DNA鏈,，就有一個熒光分子形成,，實(shí)現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后,，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀,。混勻后,，4℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,，測定RNA溶液 濃度和純度。
以下是*線蟲通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
組織牛病性腹瀉病II型（Bovine Viral Diarrhoea Virus -2,；BVDV-2）定量PCR擴(kuò)增檢測試盒
醋酸鉛血液牛病性腹瀉病II型（Bovine Viral Diarrhoea Virus -2,；BVDV-2）定量PCR擴(kuò)增檢測試盒
二碘化鉛體液牛病性腹瀉病II型（Bovine Viral Diarrhoea Virus -2；BVDV-2）定量PCR擴(kuò)增檢測試盒
二化鉛牛病性腹瀉病II型（Bovine Viral Diarrhoea Virus -2,；BVDV-2）標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測試盒
釩酸鉛通用型牛鸚鵡熱衣原體基因檢測試盒
氟硼酸鉛通用型牛傳染性鼻氣管炎（Infectious Bovine Rhinotracheitis,；IBR/ Bovine Herpesvirus-1；BHV-1）基因檢測試盒
過氧化鉛通用型牛副結(jié)核?。↗ohne’s disease或M. paratuberculosis）基因檢測試盒
黃色氧化鉛通用型牛呼吸綜合癥（BRSV）基因檢測試盒
式酸鉛通用型牛鉤端螺旋體（L. hardjo）基因檢測試盒
*線蟲通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒硫化鉛通用型牛白血?。˙ovine Leukemia Virus/Enzootic Bovine Leukosis；BLV/EBL）基因檢測試盒
化鉛通用型牛藍(lán)舌?。˙lue Tongue）基因檢測試盒
鉛通用型牛冠狀?。˙CV）基因檢測試盒
四醋酸鉛通用型牛輪狀病（ROTO）基因檢測試盒
碳酸鉛通用型?？谔阋撸‵MDV）基因檢測試盒
亞酸鉛通用型牛副流感（PIV）基因檢測試盒庚酸鈉(C7:0)10051-45-3庚酸鈉(C7:0),標(biāo)準(zhǔn)品,，有證書 ,100mg/500mg/1gm
庚酸酯 (C7:0)庚酸酯 (C7:0),標(biāo)準(zhǔn)品，有證書 ,100mg/500mg/1gm/5gm/10gm
庚酸膽固醇酯/膽固醇庚酸酯(C7:0)1182-07-6庚酸膽固醇酯/膽固醇庚酸酯(C7:0),標(biāo)準(zhǔn)品,，有證書 ,100mg/500mg/1gm
庚酸(C7:0)庚酸(C7:0),標(biāo)準(zhǔn)品,，有證書 ,100mg/500mg/1gm/5gm/10gm
庚醇磺酸酯(C7:0)庚醇磺酸酯(C7:0),標(biāo)準(zhǔn)品，有證書 ,100mg/500mg/1gm
鉻鐵礦成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（富鉻鐵礦）50g/瓶
鉻鐵礦成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)50g/瓶
鉻鐵礦成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)50g/瓶
鉻鐵礦成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Chromite200g/瓶
鉻鐵礦成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Chromite200g/瓶
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平,、離心機(jī),、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱,、可調(diào)移液器（2 µL,、20µL、200 µL,、1000 µL）,。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪,、眼科鑷,、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管,、吸頭（10 µL,、200 µL、1000 µL）,、滅菌雙蒸水,。
具有下列特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板,，操作簡單,，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,，特異性強(qiáng),。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳,。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果,。產(chǎn)品僅用于科研