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產(chǎn)品特征:
靈敏度高：能對(duì)低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量,。
特異性強(qiáng)：采用熱啟動(dòng)酶的激活機(jī)制，抑制非特異性擴(kuò)增 ,。
重復(fù)性好：擴(kuò)增曲線重合度高,，受干擾影響少,。
擴(kuò)增效率高：擴(kuò)增曲線Ct值低，起峰快,，效率高。
原理:
所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。產(chǎn)品僅用于科研

壞死梭桿菌探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞,，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,，蓋緊管蓋,。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層,。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀,。混勻后,，4℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度,。
檢測(cè)方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過(guò)量SYBR熒光染料,，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,，發(fā)射熒光信號(hào)，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào),，從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針?lè)ǎ?br />探針完整時(shí)，產(chǎn)品僅用于科研報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收,；PCR擴(kuò)增時(shí),，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成,，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。

需要自備的器材：

1．儀器：分析天平、離心機(jī),、熒光 PCR 擴(kuò)增儀,、組織研磨器、-20 ℃冰箱,、可調(diào)移液器（2 µL,、20µL、200 µL,、1000 µL）,。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪,、眼科鑷,、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管,、吸頭（10 µL,、200 µL、1000 µL）,、滅菌雙蒸水,。
具有下列特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板,，操作簡(jiǎn)單,，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,，特異性強(qiáng),。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp,。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳,。
4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
以下是壞死梭桿菌探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：

鄰三氟苯體液總膽汁酸酶循環(huán)比色法定量檢測(cè)試盒

4-苯氧異酸通用型二氧化碳（CO2）濃度酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試盒

2--5-氟煙酸血液二氧化碳（CO2）濃度酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試盒

N-Boc-(S)-3-酸哌啶體液二氧化碳（CO2）濃度酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試盒

吲唑-6-硼酸植物二氧化碳（CO2）濃度酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試盒

4-氨基-3-碘吡啶飲料二氧化碳（CO2）濃度酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試盒

6--1H-吲唑-3-食物二氧化碳（CO2）濃度酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試盒

4-(4,4,5,5-四基-1,3,2-二氧雜硼-2-基)-1H-吲唑通用型肌酐（CREATININE）化學(xué)比色法定量檢測(cè)試盒

5--3-基吡啶-2-羧酸組織肌酐（CREATININE）化學(xué)比色法定量檢測(cè)試盒

2-異基苯酚血液肌酐（CREATININE）化學(xué)比色法定量檢測(cè)試盒

[(1R)-3-羥基-1-苯基基]氨基酸芐酯體液肌酐（CREATININE）化學(xué)比色法定量檢測(cè)試盒

2,5-二異煙酸通用型肌酐（CREATININE）酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試盒

3-異煙酸組織肌酐（CREATININE）酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試盒

壞死梭桿菌探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒Boc-1-氨基環(huán)基酸血液肌酐（CREATININE）酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試盒

河豚魚源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
核桃源性成分LAMP試劑盒
核桃源性成分PCR檢測(cè)試劑盒
核桃源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒
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