詳細(xì)介紹
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔,;設(shè)兩個陰性對照孔,,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,,加入純細(xì)胞裂解液100μl,。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜,。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,,即甩去),,之后將洗滌液注滿板孔,,浸泡1-2分鐘,間歇搖動,。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl,。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min,。
(6)洗板,,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl,。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min。
(9)洗板,,同(4),。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,,置37℃暗處反應(yīng)15-20min,。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,,計算S/N值,。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
人細(xì)胞色素c氧化酶亞基VIB多肽1英文名稱:Human cytochrome c oxidase subunit Vib polypeptide 1(ubiquitous (COX6B1 ELISA kit產(chǎn)品別名:人COX6B1 elisa試劑盒用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human cytochrome c oxidase subunit Vib polypeptide 1(ubiquitous (COX6B1 ELISA kit |
貨號 | CS-E3879 |
試劑配制:
1,、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2,、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品),。
3,、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4,、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶,。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶,。
6,、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8,、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4),。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過一夜,,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),,稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,,于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,,或反復(fù)凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測,。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,,請廢棄,。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋,。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應(yīng)為室溫,。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外),。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器,,如無微量振蕩器,,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙孔檢測,。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗結(jié)果,。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作,。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時,請按國家生物試驗室安全防護(hù)條列執(zhí)行,。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
載玻片細(xì)胞βCOLLAGEN I蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試盒Streptavidin,SA 鏈霉親和素
冰凍切片組織COLLAGEN I蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試盒Recomb Protein G/FITC 熒光素(FITC)標(biāo)記重組蛋白-G
石蠟切片組織COLLAGEN I蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試盒Recomb Protein A 重組蛋白A
細(xì)胞COLLAGEN I蛋白表達(dá)比色法定量檢測試盒Recomb Protein G 重組蛋白G
細(xì)胞COLLAGEN I蛋白表達(dá)熒光定量檢測試盒GST-Tag protein 重組谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶
COLLAGEN I蛋白表達(dá)西方雜交分析試盒Cholesterol 膽固醇
COLLAGEN I蛋白免疫共沉淀分析試盒Have the biological activity Peptide products 有生物學(xué)活性的多肽產(chǎn)品
人細(xì)胞色素c氧化酶亞基VIB多肽1ELISA試劑盒COLLAGEN I蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試盒Beta-Amyloid(1-16) β淀粉樣肽1-16(多肽蛋白)
細(xì)胞COLLAGEN II蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試盒Beta-Amyloid (31-35) β淀粉樣肽31-35(多肽蛋白)
載玻片細(xì)胞COLLAGEN II蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒Beta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽1-28(多肽蛋白)
冰凍切片組織COLLAGEN II蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒Beta-Amyloid(1-40) β淀粉樣肽(1-40)(多肽蛋白)
石蠟切片組織COLLAGEN II蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒A Beta1-40 (mutation type, MT) peptide 突變型β淀粉樣肽1-40
載玻片細(xì)胞βCOLLAGEN II蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試盒A Beta1-40 (H-3-me6;H-3-me13;H-3-me14; Beta-Amyloid 1-40) β淀粉樣肽1-40(結(jié)構(gòu)改造)
冰凍切片組織COLLAGEN II蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試盒A Beta29-40( Beta-Amyloid 29-40) β淀粉樣肽29-40(野生型)
石蠟切片組織COLLAGEN II蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試盒A Beta29-42( Beta-Amyloid 29-42) β淀粉樣肽29-42(野生型)Cy3–conjugated Affinipure Goat Anti-Mouse IgG(H+L)
Cy3–conjugated Affinipure Goat Anti-Mouse IgG(H+L)C1orf158英文名稱:phospho-ASK1 (Ser83)人異鎖鏈(IDES)免疫試盒
英文名稱:AFP化絲裂原活化蛋白激酶激酶5體
phospho-YES1(Tyr537)英文名稱:TIE2F-box蛋白家族FBXO7抗體
C21orf66英文名稱:AADACL1人異檸檬脫酶(ICD)免疫試盒
ZNF772英文名稱:TAB1化粘著斑激酶體
Phospho-ZAP70 (Tyr315 + Tyr319)英文名稱:TankyraseF-box蛋白家族FBXO11抗體
CDC42EP3英文名稱:Astrocyte人異常凝血酶原(APT)免疫試盒
ZNF740英文名稱:TXNIP化脆性組三體體
Phospho-ZAP70 (Tyr493)英文名稱:Tubulin-betaF-box蛋白家族FBXO25抗體