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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品,， 含有Taq DNA 聚合酶,、dNTPs、MgCl2,、反應(yīng)緩沖液,、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),，具有廣泛的用途。
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品特征:
靈敏度高：能對(duì)低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量,。
特異性強(qiáng)：采用熱啟動(dòng)酶的激活機(jī)制，抑制非特異性擴(kuò)增 ,。
重復(fù)性好：擴(kuò)增曲線重合度高,，受干擾影響少,。
擴(kuò)增效率高：擴(kuò)增曲線Ct值低，起峰快,，效率高,。
原理:
所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Echinococcus granulosus |
貨號(hào) | CP934156 |
細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞,，室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋,。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,，混勻后15到30℃孵育10分鐘后,，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液,，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀,?；靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度,。
檢測(cè)方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中,，加入過(guò)量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,，發(fā)射熒光信號(hào),，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào)，從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針?lè)ǎ?br />探針完整時(shí),，產(chǎn)品僅用于科研報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時(shí),，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),，即每擴(kuò)增一條DNA鏈,，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平,、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀,、組織研磨器,、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL,、20µL,、200 µL、1000 µL）,。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管,、眼科剪、眼科鑷,、生理鹽水,、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL,、200 µL,、1000 µL）、滅菌雙蒸水,。
具有下列特點(diǎn)：
1.即開(kāi)即用,，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單,，定量準(zhǔn)確快速,。
2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp,。
3. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳,。
4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
以下是細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
N-1-Boc-2-酸酯MYC蛋白免疫共沉淀分析試盒
1-BOC-3-酸酯MYC蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試盒
3--4-(三氟氧基)苯腈 細(xì)胞TNF ALPHA蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試盒
(S)-2-Boc-氨基-1,4-醇載玻片細(xì)胞TNF ALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試盒
4--2-氟吡啶冰凍切片組織TNF ALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試盒
1-氨基-1-環(huán)烷腈鹽酸鹽石蠟切片組織TNF ALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試盒
(1R)-1-(3,5-雙三氟基苯基)醇 載玻片細(xì)胞TNF ALPHA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試盒
6--7-氟喹啉 冰凍切片組織TNF ALPHA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試盒
3-氟-4-芐 石蠟切片組織TNF ALPHA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試盒
4,5-二-2-硝基苯 細(xì)胞TNF ALPHA蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試盒
間碘苯 細(xì)胞TNF ALPHA蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試盒
2-碘代苯 TNF ALPHA蛋白表達(dá)西方雜交分析試盒
2-氧基氰苯TNF ALPHA蛋白免疫共沉淀分析試盒
細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒4-芐基嗎啉-2-腈TNF ALPHA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試盒
(R)--2-羧酸二鹽 細(xì)胞TNF BETA蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試盒芹菜素Apigenin520-36-520mgHPLC≥98%
芹菜素-7-O-槐糖苷Apigenin-7-O-β-D-20mgHPLC≥98%
秦皮苷;白蠟樹(shù)苷Fraxin524-30-120mgHPLC≥98%
秦皮素;七葉甙,七葉苷,七葉樹(shù)素Esculin531-75-920mgHPLC≥98%
秦皮素;秦皮亭;白蠟樹(shù)內(nèi)酯Fraxetin574-84-520mgHPLC≥98%
秦皮素;6,7-二羥基香豆素6,7-Dihydroxycoumarin305-01-120mgHPLC≥98%
青蒿素,；青蒿素A; 黃花蒿素 AArteannuin A207446-92-220mgHPLC≥98%
青蒿素,；黃花蒿素、黃蒿素Arteannuin63968-64-920mgHPLC≥98%
青蒿酸,；春活力Artemisic acid80286-58-420mgHPLC≥98%
青蒿素,；青蒿素BArteannuin B50906-56-420mgHPLC≥98%