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產(chǎn)品簡介
棘球絳蟲通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶,、dNTPs,、MgCl2、反應緩沖液,、PCR 增強劑,、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應，具有廣泛的用途,。
詳細介紹
產(chǎn)品特征:
靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進行定量,。
特異性強：采用熱啟動酶的激活機制，抑制非特異性擴增 ,。
重復性好：擴增曲線重合度高,，受干擾影響少。
擴增效率高：擴增曲線Ct值低,，起峰快,，效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術,，是指在PCR反應體系中加入熒光基團,，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法,。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Echinococcus spp. |
貨號 | CP934157 |
棘球絳蟲通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞,，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,，蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,，測定RNA溶液 濃度和純度。
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應體系中,，加入過量SYBR熒光染料,，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，發(fā)射熒光信號,，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時,，產(chǎn)品僅用于科研報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收,；PCR擴增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈,，就有一個熒光分子形成,，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平,、離心機,、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器,、-20 ℃冰箱,、可調移液器（2 µL、20µL,、200 µL,、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應管,、眼科剪,、眼科鑷、生理鹽水,、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管,、吸頭（10 µL、200 µL,、1000 µL）,、滅菌雙蒸水,。
具有下列特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板,，操作簡單,，定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,，特異性強,。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳,。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結果,。
以下是棘球絳蟲通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關產(chǎn)品：
2--3-氨基-6-基吡啶載玻片細胞TNF BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試盒
雙酚酸冰凍切片組織TNF BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試盒
2-(2-吡啶酮-1-基)-1,1,3,3-四基脲四氟硼酸鹽石蠟切片組織TNF BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試盒
4-羥基-3-三氟基苯腈 載玻片細胞TNF BETA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試盒
4-基-3-酮基-N-苯基戊酰胺 冰凍切片組織TNF BETA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試盒
3-基-5-硝基苯腈 石蠟切片組織TNF BETA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試盒
3,5-二氟-4-氰基苯酚 細胞TNF BETA蛋白表達比色法定量檢測試盒
3,5-二氟苯酮 細胞TNF BETA蛋白表達熒光定量檢測試盒
2-基戊醛 TNF BETA蛋白表達西方雜交分析試盒
對基苯酚TNF BETA蛋白免疫共沉淀分析試盒
2-(基氨基)基氨基酸叔酯TNF BETA蛋白表達ELISA定量檢測試盒
1-Boc-3-吡咯烷酸酯 細胞CREB蛋白表達流式細胞儀檢測試盒
4,4-二氟環(huán)己酸載玻片細胞CREB蛋白表達熒光顯微鏡檢測試盒
棘球絳蟲通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒Fmoc-L-谷氨酸-α-芐酯冰凍切片組織CREB蛋白表達熒光顯微鏡檢測試盒
4-氨基-6--1,3-苯二磺酰胺石蠟切片組織CREB蛋白表達熒光顯微鏡檢測試盒青藤堿Sinomenine115-53-720mgHPLC≥98%
酸東莨菪堿,；東莨菪堿酸鹽Scopolamine Hydrobromide114-49-820mgHPLC≥98%
秋水仙堿;秋水仙素Colchicine64-86-820mgHPLC≥98%
曲札茋苷Piceatannol 3'-O-glucoside94356-26-020mgHPLC≥98%
去斑蝥素Norcantharidin129403020mgHPLC≥98%
去烏藥堿Higenamine5843-65-220mgHPLC≥98%
去氧基姜黃素Demethoxycurcumin24939-17-120mgHPLC≥98%
去異波爾定;去基異波爾定Norisoboldine23599-69-120mgHPLC≥98%
去澤拉木醛;去澤拉木醇Demethylzeylasteral107316-88-120mgHPLC≥98%
去芹糖桔梗皂苷DDeapio platycodinD78763-58-320mgHPLC≥98%