詳細介紹
人組織因子途徑抑制物-2英文名稱:Human TFPI-2 ELISA Kit產(chǎn)品別名:人TFPI-2 elisa試劑盒用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human TFPI-2 ELISA Kit |
貨號 | CS-E3644 |
試劑配制:
1,、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔),。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品),。
3,、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4,、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶,。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶,。
6,、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8,、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4),。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過一夜,,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融,。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,,或反復凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測,。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融,。
注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃。復溶后的標準品若未用完,,請廢棄,。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋,。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應為室溫,。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應終止液除外),。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻Y(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器,,如無微量振蕩器,,可在反應孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測,。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,,嚴禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗結(jié)果,。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作,。特別是檢測血液或者其他體液標本時,請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行,。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
香蕉炭疽盤長孢菌Anti-ZCWCC1 ZCWCC1抗體
許旺酵母Anti-Zfp91 白血病相關(guān)新基因抗體
清酒酵母Anti-ZNF217 鋅指脂蛋白217抗體
糖化酵母Anti-ZNF268 鋅指脂蛋白-1b抗體
卡爾斯伯酵母Anti-ZNF268 鋅指脂蛋白-1c抗體
滅酵母Anti-ZNF268 鋅指脂蛋白抗體
深紅酵母Anti-ZNF300 鋅指蛋白300抗體
粘紅酵母Anti-ZNF307 鋅指蛋白307抗體
土星漢遜酵母Anti-ZNF474/ZFP106 鋅指蛋白474抗體
杰漢遜酵母Anti-ZO-1 胞質(zhì)緊密粘連蛋白1抗體
阿拉伯糖醇漢遜酵母Anti-ZW10 peptide 著絲粒蛋白抗體
健強地霉Anti-Zyxin/ESP 2 斑聯(lián)蛋白抗體
產(chǎn)朊假絲酵母Anti-Phospho-Zyxin (Ser142/Ser143) 酸化斑聯(lián)蛋白抗體
熱帶假絲酵母Anti-人T淋巴細胞亞群檢測盒 人T淋巴細胞亞群檢測盒 (T-Subset)
近平滑假絲酵母anti-Melamine 三聚氰胺抗體 曙紅Y(水溶)綿羊補體片段3b受體elisa試盒
蘇丹Ⅳ人T細胞受體elisa試盒
蘇丹II人SH2攜帶蛋白elisa試盒
天青I酸果糖激酶elisa試盒
萘啶酸猴白介素2elisa試盒
藍6B人主要穹窿蛋白elisa試盒
2,4-二羥基苯酸己糖激酶elisa試盒
孔雀石綠人神經(jīng)細胞粘附分子配體1elisa試盒
人組織因子途徑抑制物-2ELISA試劑盒亮綠兔子Ⅰ型膠原elisa試盒
茜素黃R人α2抗纖溶酶elisa試盒
茜素紅人β葡萄糖酸苷酶elisa試盒
茜素人延伸蛋白Aelisa試盒
基橙人α烯醇化酶elisa試盒
鉻藍黑R人α-輔肌動蛋白3elisa試盒
酚酞人TH糖蛋白elisa試盒
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl,;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl,。
(2)酶標板置4℃,,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,,即甩去),,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,,間歇搖動,。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次,。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min,。
(6)洗板,同(4),。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl,。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min,。
(9)洗板,,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,,輕輕混勻10s,,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應,。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾,。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準,。