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上海莼試生物技術(shù)有限公司 |
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人組蛋白乙酰化酶英文名稱：HAT ELISA Kit產(chǎn)品別名：人HAT elisa試劑盒用于測定血清,，血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | HAT ELISA Kit |
貨號(hào) | CS-E3656 |
試劑配制：
1,、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2,、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）,。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶,。
4,、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5,、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶,。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7,、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8,、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9,、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶,，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10,、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）,。
樣本處理及要求：
1. 血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過一夜，然后1000×g離心20 分鐘,，取上清即可,，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測,，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測量結(jié)果）,，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比,，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中,，于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,，或反復(fù)凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測,。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請1000×g離心20分鐘,，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
注意事項(xiàng)：
1.使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,，請廢棄,。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋,。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?，F(xiàn)象,，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
（加熱溫度不要超過50℃）使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫,。
4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）,。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器,，如無微量振蕩器,，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時(shí)建議作雙孔檢測,。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用,，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用,！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果,。
8. 試驗(yàn)中請穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時(shí),，請按國家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行,。
以下是公司正在*的產(chǎn)品：
華根霉Anti-ALT1/GPT 1/FITC 熒光素標(biāo)記谷酸基轉(zhuǎn)移酶1抗體IgG
華根霉Anti-AMACR/P504S /FITC 熒光素標(biāo)記α－基酰基輔酶A消旋酶抗體IgG
人組蛋白乙?；窫LISA試劑盒根霉屬的菌Anti-HADHSC (human)/FITC 熒光素標(biāo)記短鏈L-3羥烷基輔酶A脫酶抗體（人）IgG
少根根霉Anti-HADHSC (rat, mouse)/FITC 熒光素標(biāo)記短鏈L-3羥烷基輔酶A脫酶抗體（大鼠,，小鼠）IgG
少根根霉Anti-Amph/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)元突觸前膜蛋白抗體IgG
少根根霉Anti-AMPK alpha-1 /FITC 熒光素標(biāo)記腺苷單酸活化蛋白激酶α1抗體IgG
少根根霉Anti-AMPK alpha 2/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠腺苷單酸活化蛋白激酶α2抗體IgG
白腐菌Anti-AMPK alpha-1(phospho Ser485+Ser491) /FITC 熒光素標(biāo)記酸化腺苷單酸活化蛋白激酶α1抗體IgG
蕁青霉Anti-AMPK beta-1(phospho Ser108) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、大,、小鼠酸化腺苷單酸活化蛋白激酶β1抗體IgG
小刺青霉Anti-AMPK beta-1(phospho Ser182) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠酸化腺苷單酸活化蛋白激酶β1抗體IgG
婁地青霉Anti-AMPK Beta1/FITC 熒光素標(biāo)記腺苷單酸活化蛋白激酶β1抗體IgG
產(chǎn)紫青霉Anti-Amylin/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體IgG
赭綠青霉Anti-Ang- II /FITC 熒光素標(biāo)記血管緊張素II抗體IgG
特異青霉Anti-ANG-2/FITC 熒光素標(biāo)記血管生成素-2抗體IgG
淡紫青霉Anti-Ankyrin G/ANK-3/ankyrin 3/FITC 熒光素標(biāo)記錨定蛋白G抗體IgG 二十四烷人促狀腺素釋放激素elisa試盒
二十八烷人促睡眠肽elisa試盒
代正烷人促胰液素elisa試盒
三烷人促狀腺素elisa試盒
三十四烷人促黃體激素elisa試盒
三十六烷人型肝炎IgGelisa試盒
異戊烷人疊氮胸苷elisa試盒
1.3－醇－2人凋亡誘導(dǎo)因子elisa試盒
1,3-二-2-醇人凋亡抑制蛋白elisa試盒
1-醇人凋亡相關(guān)因子elisa試盒
2-基-2-硫醇人凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶Ielisa試盒
3-烯醇人凋亡相關(guān)因子配體elisa試盒
2-醇人凋亡相關(guān)半胱酸肽酶4elisa試盒
異硫醇人凋亡蛋白酶激活因子1elisa試盒
異戊基硫醇人淀粉樣前體蛋白elisa試盒
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl,；另設(shè)一個(gè)空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl,。
（2）酶標(biāo)板置4℃,，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后,，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔,，浸泡1-2分鐘,，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復(fù)洗滌3-4次,。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl,。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),，孵育60min。
（6）洗板,，同（4）,。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),，孵育60min,。
（9）洗板，同（4）,。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl,，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min,。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng),。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2）,，以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾,。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn),。
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