詳細(xì)介紹
試劑配制:
1,、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔),。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品),。
3,、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶,。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶,。
5,、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6,、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7,、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9,、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10,、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β刺激蛋白22英文名稱(chēng):Human TSC22 ELISA Kit產(chǎn)品別名:人TSC22 elisa試劑盒用于測(cè)定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本,。
產(chǎn)品名稱(chēng) | |
英文名稱(chēng) | Human TSC22 ELISA Kit |
貨號(hào) | CS-E3667 |
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl,;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl,。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜,。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),,之后將洗滌液注滿板孔,,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng),。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復(fù)洗滌3-4次,。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl,。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min。
(6)洗板,,同(4),。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min,。
(9)洗板,同(4),。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min,。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng),。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾,。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值,。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn),。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一夜,然后1000×g離心20 分鐘,,取上清即可,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè),,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),,稱(chēng)重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,,于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,,或反復(fù)凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè),。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請(qǐng)1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
釀酒酵母Anti-BDNF/FITC 熒光素標(biāo)記BDNF蛋白抗體IgG
釀酒酵母Anti-BECN1/FITC 熒光素標(biāo)記一種抑癌基因抗體IgG
卡爾斯伯酵母Anti-EpCAM/CD326/FITC 熒光素標(biāo)記上皮細(xì)胞特異性EpCAM/CD326蛋白抗體IgG
卡爾斯伯酵母Anti-Beta-casein( Beta-casein)/FITC 熒光素標(biāo)記 β-酪蛋白(抗體)IgG
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β刺激蛋白22ELISA試劑盒 卡爾斯伯酵母Anti-BFGF/FITC 熒光素標(biāo)記性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體IgG
深紅酵母Anti-BGP/FITC 熒光素標(biāo)記骨保護(hù)蛋白/骨鈣素抗體IgG
膠紅酵母Anti-Bid/FITC 熒光素標(biāo)記BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體IgG
小紅酵母Anti-AQP-2/HRP (aquaporin Protein-2) 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記水通道蛋白-2抗體IgG
粘紅酵母Anti-BIN1/FITC 熒光素標(biāo)記橋連整合因子蛋白抗體IgG
粘紅酵母Anti-Bim/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體IgG
膜醭畢赤酵母Anti-phospho-Bim(Ser55) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠酸化細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體IgG
伯頓畢赤酵母Anti-Bim(phospho Ser87)/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、大、小鼠酸化細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體IgG
菅囊酵母Anti-phospho-Bim(Ser69) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、大,、小鼠酸化細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體IgG
亞膜漢遜酵母Anti-BIRC5/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞凋亡抑制因子5抗體IgG
施氏漢遜酵母Anti-CD203c/FITC 熒光素標(biāo)記CD203c抗體IgG 2,2-雙二羥基苯胺(Bis-tris)人白細(xì)胞活化黏附因子elisa試盒
N,N-雙(2-羥基)甘酸(Bicine)人白細(xì)胞共同抗原elisa試盒
N-(2-酰胺基)-2-亞基二酸(ADA)人白細(xì)胞彈性蛋白酶elisa試盒
N-(酰基)-2-基烷磺酸(ACES)人白色念珠菌elisa試盒
PH緩沖人白三烯elisa試盒
3-嗎啉磺酸人白三烯E4elisa試盒
4-羥基嗪磺酸人白三烯D4elisa試盒
標(biāo)準(zhǔn)品人白三烯C4elisa試盒
昔洛韋人白三烯B4elisa試盒
馬噴特羅人白介素9elisa試盒
氟洛芬人白介素8elisa試盒
托曲珠利人白介素2受體elisa試盒
妥曲珠利亞砜人白介素2elisa試盒
妥曲珠利砜人白介素2可溶性受體β鏈elisa試盒
己烷雌酚人白介素2可溶性受體α鏈elisa試盒
注意事項(xiàng):
1.使用前請(qǐng)保存在2-8℃,。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,,請(qǐng)廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置,,會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋,。因此使用前請(qǐng)1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液,。
(加熱溫度不要超過(guò)50℃)使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫,。
4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,,使用微量振蕩器,,如無(wú)微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻,。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙孔檢測(cè),。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用,!否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作,。特別是檢測(cè)血液或者其他體液標(biāo)本時(shí),,請(qǐng)按國(guó)家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行,。