詳細介紹
人腫瘤壞死因子誘導基因6蛋白英文名稱:Human TNFAIP6 ELISA Kit產(chǎn)品別名:人TNFAIP6 elisa試劑盒用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標本,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human TNFAIP6 ELISA Kit |
貨號 | CS-E3671 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔),。
2,、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3,、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶,。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶,。
5,、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6,、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7,、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9,、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10,、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過一夜,,然后1000×g離心20 分鐘,,取上清即可,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融,。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,,并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細胞,,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,,取上清檢測。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融,。
注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃,。復溶后的標準品若未用完,請廢棄,。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,,會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象,,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液,。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應終止液除外),。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻Y(jié)果尤為重要,,使用微量振蕩器,,如無微量振蕩器,可在反應孵育前手工輕輕混勻,。
6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測,。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴禁在不同的液體之間混用,!否則將影響試驗結(jié)果,。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標本時,,請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行,。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
土曲霉Anti-phospho-c-Abl/v-abl(Thr735) /FITC 熒光素標記兔抗人、大,、小鼠酸化非受體酪酸激酶c-Abl抗體IgG
醬油曲霉Anti-phospho-c-Abl(Tyr89) /FITC 熒光素標記兔抗人,、小鼠酸化非受體酪酸激酶c-Abl抗體IgG
寄生曲霉Anti-Phospho-HDAC3 (Ser424)/FITC 熒光素標記兔抗人、大,、小鼠酸化組蛋白去?;?抗體IgG
米曲霉Anti-CAD/CPAN/FITC 熒光素標記Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抗體IgG
嗜熱鏈霉菌Anti-CA I/FITC 熒光素標記碳酸酐酶1抗體IgG
華美鏈霉菌Anti-CA II /FITC 熒光素標記碳酸酐酶2抗體IgG
人腫瘤壞死因子誘導基因6蛋白ELISA試劑盒玫瑰色鏈霉菌Anti-Calcineurin Alpha /PP-2B alpha 1 /FITC 熒光素標記蛋白酸酯酶-2B催化亞單位抗體IgG
龜裂鏈霉菌Anti-caldesmon/smooth muscle /FITC 熒光素標記鈣調(diào)結(jié)合蛋白/鈣調(diào)素結(jié)合蛋白抗體IgG
黑化鏈霉菌Anti-p-Caldesmon/FITC 熒光素標記酸化鈣介質(zhì)素抗體IgG
細黃鏈霉菌Anti-Smoothened/SMOH /FITC 熒光素標記跨膜蛋白Smoothened抗體IgG
藤黃色鏈霉菌Anti-Calpain 1/FITC 熒光素標記鈣蛋白酶抗體IgG
黃色長孢鏈霉菌Anti-Calpain 2/FITC 熒光素標記鈣蛋白酶2抗體IgG
吸水鏈霉菌Anti-Calponin 1/FITC 熒光素標記鈣調(diào)節(jié)蛋白-1抗體IgG
吸水鏈霉菌Anti-Camk1g/FITC 熒光素標記鈣/鈣調(diào)蛋白依蛋白激酶IG抗體 IgG
灰色鏈霉菌Anti-CaMK2a/FITC 熒光素標記鈣/鈣調(diào)素依蛋白激酶2α抗體IgG 蒿本內(nèi)酯人踝蛋白elisa試盒
基蓮心人花生四烯酸elisa試盒
異蓮心人花生四烯酸5脂加氧酶elisa試盒
蓮心人紅細胞生成素受體elisa試盒
莫諾苷人紅細胞生成素elisa試盒
漢黃芩苷人紅細胞膜蛋白elisa試盒
木蘭花人紅細胞刺激因子elisa試盒
紅花色素 A人橫紋肌輔肌動蛋白αelisa試盒
蕓香柚皮苷人黑素瘤衍生亮酸拉鏈額外核因子elisa試盒
異水飛薊賓人黑色素細胞抗體elisa試盒
水飛薊汀人黑色素細胞刺激素elisa試盒
二丹參人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子elisa試盒
丹參I 人黑色素瘤標記物elisa試盒
原人參三醇人肝癌抗原elisa試盒
原人參二醇人甘油三酯elisa試盒
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔,;設兩個陰性對照孔,,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,,加入純細胞裂解液100μl,。
(2)酶標板置4℃,包被過夜,。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),,之后將洗滌液注滿板孔,,浸泡1-2分鐘,間歇搖動,。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl,。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min,。
(6)洗板,,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl,。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min,。
(9)洗板,同(4),。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min,。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應,。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾,。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值,。S/N≥2.1為陽性判定標準,。