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小鼠骨粘連蛋白ELISA試劑盒為我司主營(yíng)產(chǎn)品之一,，產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),，并經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測(cè),，我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行,。產(chǎn)品供貨周期短,，供貨及時(shí)，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù),。

操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl,；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl,。 
（2）酶標(biāo)板置4℃,，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿(mǎn)板孔后,，即甩去），之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔,，浸泡1-2分鐘,，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復(fù)洗滌3-4次,。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl,。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),，孵育60min。 
（6）洗板,，同（4）,。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),，孵育60min,。 
（9）洗板，同（4）,。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl,，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min,。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng),。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾,。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后,，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn),。
小鼠骨粘連蛋白英文名稱(chēng)：ON ELISA Kit產(chǎn)品別名：小鼠ON elisa試劑盒用于測(cè)定血清,，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本,。

產(chǎn)品名稱(chēng)	小鼠骨粘連蛋白ELISA試劑盒
英文名稱(chēng)	ON ELISA Kit
貨號(hào)	CS-E3430

試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）,。
2,、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3,、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶,。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶,。
5,、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6,、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7,、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶,。
9,、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10,、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

樣本處理及要求：
1.  血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一夜,，然后1000×g離心20 分鐘,，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè),，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.  組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果）,，稱(chēng)重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比,，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,，并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,，取上清檢測(cè)。
4.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請(qǐng)1000×g離心20分鐘,，取上清即可檢測(cè),，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

注意事項(xiàng)：

1.使用前請(qǐng)保存在2-8℃,。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請(qǐng)廢棄,。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置,，會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象,，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液,。
（加熱溫度不要超過(guò)50℃）使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）,。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,，使用微量振蕩器，如無(wú)微量振蕩器,，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻,。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙孔檢測(cè),。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用,！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果,。
8. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液標(biāo)本時(shí),，請(qǐng)按國(guó)家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行,。
以下是公司正在*的產(chǎn)品：

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2×Pfu PCR MasterMix雞狀腺素(T4)ELISA試盒

2×GoldTaq PCR MasterMix雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試盒

2×Hotstart Taq PCR MasterMix雞可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試盒

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