詳細(xì)介紹
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔,;設(shè)兩個陰性對照孔,,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,,加入純細(xì)胞裂解液100μl,。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜,。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),,之后將洗滌液注滿板孔,,浸泡1-2分鐘,間歇搖動,。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl,。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,,同(4),。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min,。
(9)洗板,同(4),。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min,。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng),。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾,。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值,。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn),。
小鼠凋亡相關(guān)因子配體英文名稱:FASL ELISA Kit產(chǎn)品別名:小鼠FASL elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | FASL ELISA Kit |
貨號 | CS-E3445 |
試劑配制:
1,、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔),。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品),。
3,、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4,、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶,。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶,。
6,、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7,、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4),。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過一夜,,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),,稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,,于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,,或反復(fù)凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測,。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,,請廢棄,。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置,,會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象,,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液,。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外),。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,,使用微量振蕩器,如無微量振蕩器,,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻,。
6. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用,!否則將影響試驗結(jié)果。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作,。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時,,請按國家生物試驗室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
門冬酸標(biāo)準(zhǔn)品Anti-AMPK beta 1 腺苷單酸活化蛋白激酶β1抗體
阿司匹林標(biāo)準(zhǔn)品Anti-phospho-AMPK beta 1(Ser108) 酸化腺苷單酸活化蛋白激酶β1抗體
阿司咪唑標(biāo)準(zhǔn)品Anti-phospho-AMPK beta 1(Ser182) 酸化腺苷單酸活化蛋白激酶β1抗體
阿替洛爾標(biāo)準(zhǔn)品Anti-Amylin 糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體
阿托伐他汀鈣標(biāo)準(zhǔn)品Anti-beta-Amyloid 1-42(CT) β淀粉樣肽1-42 (C端)抗體
阿托伐他汀相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品Anti-beta-Amyloid(1-16) (human) β淀粉樣肽(1-16)抗體(人)
阿托伐他汀相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品Anti-beta-Amyloid(1-16) β淀粉樣肽(1-16)抗體(小鼠,、大鼠)
阿托伐他汀相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品Anti-beta-Amyloid(31-35) β淀粉樣肽(31-35)抗體
阿托伐他汀相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品Anti-beta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽(1-28)抗體
阿托伐他汀相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品Anti-beta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽(1-28)抗體
阿托伐他汀鈣雜質(zhì)H對照品標(biāo)準(zhǔn)品Anti-beta-Amyloid(25-35) β淀粉樣肽(25-35)抗體
阿托伐他汀鈣雜質(zhì)I對照品標(biāo)準(zhǔn)品Anti-beta-Amyloid(1-40) β淀粉樣肽(1-40)抗體
阿托伐醌標(biāo)準(zhǔn)品Anti-beta-Amyloid 1-40(CT) β淀粉樣肽1-40(C端)抗體
阿托伐醌相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品Anti-beta-Amyloid 1-40(CT) β淀粉樣肽 1-40 (C端)抗體
苯磺酸阿曲庫銨標(biāo)準(zhǔn)品Anti-beta-Amyloid(1-42) β淀粉樣肽(1-42)抗體 順-6-壬烯人無翅型MMTV整合位點家族成員2(WNT2)ELISA試盒
1-環(huán)戊烯基腈ELISA Kit for Human Protein Wnt-2
2,3-二苯并呋喃-5-酸人腎臟腦蛋白(KIBRA)ELISA試盒
4--2-羥基苯酸酯ELISA Kit for Human Protein KIBRA
6--1,2,3,4-四異喹啉人WNT抑制因子1(WIF1)ELISA試盒
2--4-氧基嘧啶ELISA Kit for Human Wnt inhibitory factor 1
2--5-基嘧啶人無翅型MMTV整合位點家族成員3A(WNT3A)ELISA試盒
小鼠凋亡相關(guān)因子配體ELISA試劑盒4,4-二氟庚二酸二酯ELISA Kit for Human Protein Wnt-3a
鹽酸瓦地那非三水合物人腎母細(xì)胞瘤蛋白1相互作用蛋白(WTIP)ELISA試盒
3,3-二基嗪-2-ELISA Kit for Human Wilms tumor protein 1-interacting protein
3,5-二基苯腈人無翅型MMTV整合位點家族成員5B(WNT5B)ELISA試盒
1-萘肼鹽酸鹽ELISA Kit for Human Protein Wnt-5b
3-氟-4-嗎啉基苯基異氰酸酯人腎母細(xì)胞瘤1關(guān)聯(lián)蛋白(WTAP)ELISA試盒
N-基-2-戊胺ELISA Kit for Human Pre-mRNA-splicing regulator WTAP
2-萘胺鹽酸鹽人原癌基因Wnt-1 ELISA試盒