化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
胡桃源性成分探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品,， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs,、MgCl2,、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑,、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途,。
詳細(xì)介紹
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平,、離心機(jī),、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器,、-20 ℃冰箱,、可調(diào)移液器（2 µL、20µL,、200 µL,、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管,、眼科剪,、眼科鑷、生理鹽水,、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管,、吸頭（10 µL、200 µL,、1000 µL）,、滅菌雙蒸水。
具有下列特點(diǎn)：
1.產(chǎn)品僅用于科研即開即用,，用戶只需要提供樣品 DNA 模板,，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速,。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp,。
3. PCR mix 中含上樣染料,，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,，便于分析試驗(yàn)結(jié)果,。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | 詳見說明書 |
貨號 | CP934920 |
產(chǎn)品特征:
胡桃源性成分探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強(qiáng)：采用熱啟動酶的激活機(jī)制,，抑制非特異性擴(kuò)增 。
重復(fù)性好：擴(kuò)增曲線重合度高,，受干擾影響少,。
擴(kuò)增效率高：擴(kuò)增曲線Ct值低，起峰快,，效率高,。
原理:
所謂實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料,，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收,；PCR擴(kuò)增時,，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，產(chǎn)品僅用于科研使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成,，實(shí)現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后,，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,，測定RNA溶液 濃度和純度。
以下是胡桃源性成分探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
MARK2 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK2抗體異水飛薊賓
MARCO 巨噬細(xì)胞清道夫受體抗體標(biāo)準(zhǔn)品
MARCKS 氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗體柚皮素-7-O-葡萄糖
MARCH9 膜相關(guān)環(huán)指蛋白9抗體2-O-酰山椒子烯
MARCH8 膜相關(guān)環(huán)指蛋白8抗體野菊花內(nèi)酯
MARCH7/Axotrophin 膜相關(guān)環(huán)指蛋白7抗體銀杏酚酸
MARCH6 膜相關(guān)環(huán)指蛋白6抗體鹽酸白屈菜紅
MARCH5 膜相關(guān)環(huán)指蛋白5抗體氧化石蒜
MARCH4 膜相關(guān)環(huán)指蛋白4抗體銀杏內(nèi)酯J
MARCH3 膜相關(guān)環(huán)指蛋白3抗體L-異亮氨酸
MARCH2 膜相關(guān)環(huán)指蛋白2抗體異香酚
MARCH11 膜相關(guān)環(huán)指蛋白11抗體標(biāo)準(zhǔn)品
MARCH10 膜相關(guān)環(huán)指蛋白10抗體愈創(chuàng)木酚
MARCH1 膜相關(guān)環(huán)指蛋白1抗體葉黃素
MAPKAPK5/PRAK p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激酶抗體羊藿次苷I維生素B3（煙酸）檢測試盒葒草素-2-0-B-L半乳糖苷"
維生素B9（葉酸）檢測試盒厚樸酚
維生素B12（鈷氨素）檢測試盒胡薄荷酮
維生素B5（泛酸）檢測試盒胡黃連苷I
全波長酶標(biāo)儀胡黃連苷II
全自動洗板機(jī)胡黃連苷III
全自動液晶顯示酶標(biāo)儀胡椒
胡桃源性成分探針法熒光定量PCR檢測試劑盒流行性出血熱病 EHDV檢測 ELISA試盒胡蘿卜苷
沙胺醇免疫磁珠胡麻屬苷
萊克多巴胺免疫磁珠胡桃醌