詳細(xì)介紹
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,,產(chǎn)品僅用于科研在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Mycoplasma hyorhinis |
貨號 | CP934500 |
豬鼻支原體探針法熒光定量PCR檢測試劑盒使用方法:
一,、樣品DNA的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA,。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度,。產(chǎn)品僅用于科研
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例,。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的,、可以直接使用的DN段作為陽性對照,。
1. 標(biāo)記6個離心管,分別為6,,5,,4,3,,2和1號,。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水(用帶芯槍頭,下同),。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL),。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照,。
5. 換槍頭,,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,,得10E5拷貝/μL的陽性對照,。
6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,,重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照,。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進(jìn)行定量PCR(見下步),,每個樣品做3次重復(fù),。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖:
應(yīng)用案例:
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容,。,。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分),。產(chǎn)品僅用于科研
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例,。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DN段作為陽性對照,。
2.標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,,6,,5,4,,3,,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同),。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用。5.換槍頭,,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用。
6.換槍頭,,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用,。
7.換槍頭,,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20 μL 體系,,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分,。產(chǎn)品僅用于科研
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度,;3.反應(yīng)時間,;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制,;6.PCR技術(shù)的基本原理,;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件,。
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān),。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對,。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端,。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時,,熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時,,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,,釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累,。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性,。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
5,5-二基-1-氧化吡咯啉通用型半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量檢測試盒
5,7-二-8-羥基喹啉細(xì)胞半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量檢測試盒
抗角蛋白抗體(AKA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 三聚氰胺ELISA試劑盒
抗核周因子抗體(APF)檢測試劑盒 (酶聯(lián)免疫法) 沙丁胺醇ELISA試劑盒
抗環(huán)瓜氨酸肽(CCP)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 蘇丹ELISA試劑盒
淋球菌(GN)-Ag抗原快速檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 孔雀石綠ELISA試劑盒
人乳頭瘤病毒(HPV)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 己烯雌酚ELISA試劑盒
單純皰疹病毒(HSV-II)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 硝呋索爾ELISA試劑盒
解脲支原體(UU)抗體檢測試劑盒 (酶聯(lián)免疫法) 隱性孔雀石綠ELISA試劑盒
沙眼衣原體(CT)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 環(huán)丙沙星快速檢測試劑盒
人脂聯(lián)素(Adiponectin)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 氧氟沙星快速檢測試劑盒
胰島素原(Proinsulin)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 羅格列酮快速檢測試劑盒
鼠瘦素(Murin Leptin)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 黃曲霉毒M1,、M2檢測試劑盒
人瘦素(Human Leptin)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 禽流感檢測試劑盒
胰島素(Ins Active)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 糖精鈉檢測試劑盒
C-肽(C-Peptide)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 豬口蹄疫病毒O型抗體試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
酪氨酸磷酸酶自身抗體(IA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 豬藍(lán)耳病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
抗谷氨酸脫羧酶(GAD)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 豬瘟病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
抗胰島細(xì)胞抗體(ICA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 豬細(xì)小病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
抗胰島素自身抗體(IAA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 豬圓環(huán)病毒Ⅱ型IgG抗體試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
炭疽桿菌抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 呋喃它酮代謝物快速檢測試劑盒
鼠疫桿菌抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 呋喃妥因代謝物快速檢測試劑盒
N-氧化-3,3,5,5-四基-1-吡咯啉血液半胱氨酸(cysteine)含量高效液相色譜法定量檢測試盒
N-基嗎啉體液半胱氨酸(cysteine)含量高效液相色譜法定量檢測試盒
N-氧羰基-2-氧基-1,2-二喹啉植物半胱氨酸(cysteine)含量高效液相色譜法定量檢測試盒
α-氨基喹啉通用型胱氨酸(cystine)含量比色法定量檢測試盒
α-噼口哥啉細(xì)胞胱氨酸(cystine)含量比色法定量檢測試盒
γ-基喹啉組織胱氨酸(cystine)含量比色法定量檢測試盒磺胺對氧嘧啶 Sulfamethoxydiazine651-06-950mg/支,供實(shí)驗(yàn)室檢測用
磺胺吡啶溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),有證書144-83-2磺胺吡啶溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),有證書 100ug/ml,1.2ml
磺胺吡啶溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),有證書144-83-2磺胺吡啶溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),有證書 100ug/ml,1.2ml
磺胺吡啶-13C6Sulfapyridine-13C625mg
磺胺吡啶,,純品型,,標(biāo)準(zhǔn)品,有證書144-83-2磺胺吡啶,純品型,,標(biāo)準(zhǔn)品,有證書 ,0.25g
豬鼻支原體探針法熒光定量PCR檢測試劑盒磺胺苯酰 Sulfabenzamide127-71-950mg/支,,供實(shí)驗(yàn)室檢測用
磺胺苯酰 Sulfabenzamide127-71-950mg/支,供實(shí)驗(yàn)室檢測用
磺胺苯吡唑,標(biāo)準(zhǔn)品526-08-9磺胺苯吡唑,標(biāo)準(zhǔn)品,有證書 ,0.1g
磺胺-5-氧嘧啶-d4Sulfameter-d41mg
磺胺-13C6Sulfanilamide-13C625mg