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上海莼試生物技術(shù)有限公司>供求商機(jī)>50T-納米小孢子菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒
50T-納米小孢子菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒
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  • 50T-納米小孢子菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒

舉報(bào)
貨物所在地: 上海上海市
產(chǎn)地: 進(jìn)口,、國產(chǎn)
更新時(shí)間: 2025-02-05 21:00:07
期: 2025年2月5日--2025年8月5日
已獲點(diǎn)擊: 69
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(聯(lián)系我們,,請說明是在 化工儀器網(wǎng) 上看到的信息,,謝謝!)

產(chǎn)品簡介

納米小孢子菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),,利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。

詳細(xì)介紹

注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序,;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間,;4.循環(huán)次數(shù),;5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理,;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué),;8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件,。

產(chǎn)品名稱

納米小孢子菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒

英文名稱

Microsporum nanum

貨號

CP934441

儲存條件:

14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

探針法:

納米小孢子菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān),。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對,。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端,。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時(shí),,熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離,。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累,。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系,。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
使用方法:
一,、樣品DNA的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA,。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度,。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例,。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的,、可以直接使用的DN段作為陽性對照,。
1. 標(biāo)記6個離心管,分別為6,,5,,4,3,,2和1號,。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水(用帶芯槍頭,下同),。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL),。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照,。
5. 換槍頭,,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,,得10E5拷貝/μL的陽性對照,。
6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照,。
7. NC管中不加任何陽性對照,。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進(jìn)行定量PCR(見下步),每個樣品做3次重復(fù),。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖:

應(yīng)用案例:
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容,。,。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout,。 本試劑盒免費(fèi)贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分),。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DN段作為陽性對照。
2.標(biāo)記 6 個離心管,,分別為 7,,6,5,,4,,3,2,。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩 1 分鐘,,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用,。5.換槍頭,,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用。
6.換槍頭,,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用,。
7.換槍頭,,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20  μL 體系,,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分,。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:

1,4-二羥基苯組織HSV2(HERPES SIMPLX2)病定量PCR擴(kuò)增檢測試盒

1,4-二硝基苯體液HSV2(HERPES SIMPLX2)病定量PCR擴(kuò)增檢測試盒

1,4-二烯苯HSV2(HERPES SIMPLX2)病標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測試盒

1,4-二異基苯通用型VZV(VARICELLA ZOSTER)病定性檢測試盒

1,4-雙(二基)苯細(xì)胞VZV(VARICELLA ZOSTER)病定性檢測試盒

1,5-二氟-2,4-二硝基苯組織VZV(VARICELLA ZOSTER)病定性檢測試盒

納米小孢子菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒

抗角蛋白抗體(AKA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 三聚氰胺ELISA試劑盒

抗核周因子抗體(APF)檢測試劑盒 (酶聯(lián)免疫法) 沙丁胺醇ELISA試劑盒

抗環(huán)瓜氨酸肽(CCP)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 蘇丹eLISA試劑盒

淋球菌(GN)-Ag抗原快速檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 孔雀石綠ELISA試劑盒

人乳頭瘤病毒(HPV)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 己烯雌酚ELISA試劑盒

單純皰疹病毒(HSV-II)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 硝呋索爾ELISA試劑盒

解脲支原體(UU)抗體檢測試劑盒 (酶聯(lián)免疫法) 隱性孔雀石綠ELISA試劑盒

沙眼衣原體(CT)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 環(huán)丙沙星快速檢測試劑盒

人脂聯(lián)素(Adiponectin)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 氧氟沙星快速檢測試劑盒

胰島素原(Proinsulin)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 羅格列酮快速檢測試劑盒

鼠瘦素(Murin Leptin)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 黃曲霉毒M1、M2檢測試劑盒

人瘦素(Human Leptin)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 禽流感檢測試劑盒

胰島素(Ins Active)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 糖精鈉檢測試劑盒

C-肽(C-Peptide)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 豬口蹄疫病毒O型抗體試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

酪氨酸磷酸酶自身抗體(IA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 豬藍(lán)耳病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

抗谷氨酸脫羧酶(GAD)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 豬瘟病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

抗胰島細(xì)胞抗體(ICA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 豬細(xì)小病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

抗胰島素自身抗體(IAA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 豬圓環(huán)病毒Ⅱ型IgG抗體試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

炭疽桿菌抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 呋喃它酮代謝物快速檢測試劑盒

鼠疫桿菌抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 呋喃妥因代謝物快速檢測試劑盒

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