詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Mikrocytos mackini |
貨號 | CP934443 |
產(chǎn)品特征:
馬可尼小囊蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高:能對低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量,。
特異性強(qiáng):采用熱啟動(dòng)酶的激活機(jī)制,抑制非特異性擴(kuò)增 ,。
重復(fù)性好:擴(kuò)增曲線重合度高,,受干擾影響少。
擴(kuò)增效率高:擴(kuò)增曲線Ct值低,,起峰快,,效率高。
原理:
所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),,利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。產(chǎn)品僅用于科研
檢測方法:
1.Ⅰ法:
在PCR反應(yīng)體系中,,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,,發(fā)射熒光信號,,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。
定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時(shí),,報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí),,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,,即每擴(kuò)增一條DNA鏈,,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步,。熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋,。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液,,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀,?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,,測定RNA溶液 濃度和純度,。
以下是馬可尼小囊蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:
1-基-2-苯通用型HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病定性檢測試盒
1-基-4-苯細(xì)胞HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病定性檢測試盒
1-異基-4-基苯組織HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病定性檢測試盒
2,2'-二氟聯(lián)苯體液HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病定性檢測試盒
2,2'-亞基聯(lián)苯通用型HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病定量PCR擴(kuò)增檢測試盒
2,3-二氨基氮雜苯細(xì)胞HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病定量PCR擴(kuò)增檢測試盒
2,4,5-三苯組織HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病定量PCR擴(kuò)增檢測試盒
2,4,6-三基氮雜苯體液HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病定量PCR擴(kuò)增檢測試盒
2,4,,6-三硝基-1,,3-二基-5-叔基苯HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測試盒
2,4-二基酰苯通用型KSHV(KAPOSI SARCOMA-ASSOCIATED HERPESVIRUS)病定性檢測試盒
2,4-二-1-硝基苯細(xì)胞KSHV(KAPOSI SARCOMA-ASSOCIATED HERPESVIRUS)病定性檢測試盒
馬可尼小囊蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒
抗角蛋白抗體(AKA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 三聚氰胺ELISA試劑盒
抗核周因子抗體(APF)檢測試劑盒 (酶聯(lián)免疫法) 沙丁胺醇ELISA試劑盒
抗環(huán)瓜氨酸肽(CCP)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 蘇丹ELISA試劑盒
淋球菌(GN)-Ag抗原快速檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 孔雀石綠ELISA試劑盒
人乳頭瘤病毒(HPV)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 己烯雌酚ELISA試劑盒
單純皰疹病毒(HSV-II)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 硝呋索爾ELISA試劑盒
解脲支原體(UU)抗體檢測試劑盒 (酶聯(lián)免疫法) 隱性孔雀石綠ELISA試劑盒
沙眼衣原體(CT)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 環(huán)丙沙星快速檢測試劑盒
人脂聯(lián)素(Adiponectin)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 氧氟沙星快速檢測試劑盒
胰島素原(Proinsulin)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 羅格列酮快速檢測試劑盒
鼠瘦素(Murin Leptin)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 黃曲霉毒M1、M2檢測試劑盒
人瘦素(Human Leptin)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 禽流感檢測試劑盒
胰島素(Ins Active)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 糖精鈉檢測試劑盒
C-肽(C-Peptide)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 豬口蹄疫病毒O型抗體試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
酪氨酸磷酸酶自身抗體(IA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 豬藍(lán)耳病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
抗谷氨酸脫羧酶(GAD)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 豬瘟病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
抗胰島細(xì)胞抗體(ICA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 豬細(xì)小病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
抗胰島素自身抗體(IAA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 豬圓環(huán)病毒Ⅱ型IgG抗體試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
炭疽桿菌抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 呋喃它酮代謝物快速檢測試劑盒
鼠疫桿菌抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 呋喃妥因代謝物快速檢測試劑盒
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平,、離心機(jī),、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器,、-20 ℃冰箱,、可調(diào)移液器(2 µL,、20µL、200 µL,、1000 µL),。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪,、眼科鑷,、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管,、吸頭(10 µL,、200 µL、1000 µL),、滅菌雙蒸水,。
具有下列特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,,操作簡單,,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp,。
3. PCR mix 中含上樣染料,,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,,便于分析試驗(yàn)結(jié)果,。產(chǎn)品僅用于科研